[發明專利]一種西曲瑞克的轉鹽方法

有效

• 申請號: 202011049766.0
• 申請日: 2020-09-29
• 公開（公告）號: CN112250735B
• 公開（公告）日: 2023-09-19
• 發明（設計）人: 趙冬霞;毛影;李運鐸;朱贊梅;李沁沁;婁麗麗;劉志慶;劉美朝;常歡
• 申請（專利權）人: 開封明仁藥業有限公司
• 主分類號: C07K7/23
• 分類號: C07K7/23;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20
• 代理公司: 鄭州大通專利商標代理有限公司 41111
• 代理人: 李秋紅

本發明公開了一種西曲瑞克的轉鹽方法。首先將西曲瑞克粗肽制成粗肽溶液，采用水系濾膜過濾，收集濾液；所得濾液進行反相色譜純化，收集目標峰洗脫液，得到西曲瑞克溶液；所得溶液采用反滲透膜進行濃縮，得到濃縮液；所得濃縮液采用C18反相色譜柱進行轉鹽，轉鹽過程中依次采用兩種體系進行置換，采用醋酸溶液甲醇體系進行洗脫，洗脫時在主峰出現后開始收集洗脫液，主峰完全結束后停止收集，得到西曲瑞克溶液；所得溶液采用反滲透膜進行濃縮，濃縮后所得混合液轉移至凍干盤中，放入凍干機進行凍干，得到西曲瑞克醋酸鹽成品。利用本發明對西曲瑞克進行轉鹽，其置換效率較高，所得產品中無三氟乙酸殘留。

一、技術領域：

本發明屬于生物藥品制備方法技術領域，特別是涉及一種西曲瑞克的轉鹽方法。

二、背景技術：

西曲瑞克(Cetrorelix)是一種合成的10肽，是一種黃體激素釋放激素(LHRH)拮抗劑。LHRH可與垂體細胞的膜受體結合。西曲瑞克與內源性LHRH競爭性的結合這些受體，從而控制促性腺激素的分泌。它能控制卵巢的刺激作用，預防不成熟卵泡過早排出，幫助受孕。并可用于治療乳腺癌和宮頸癌、子宮內膜異位癥、性早熟、子宮肌瘤、卵巢雄激素過多和經前綜合征。

西曲瑞克氨基酸序列：

AC-D-2-Nal-D-4-Cpa-D-3-Pal-Ser-Tyre-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2

目前，關于西曲瑞克的分離純化方法也有相關文獻公開報道。例如：1、CN201711299105.1的發明專利申請，公開了一種采用醋酸根型的陰離子交換樹脂和反相高效液相色譜的純化工藝。2、CN?201710468205.6的發明專利申請，公開了一種運用磷酸二氫鈉水溶液和乙腈溶液進行純化的方法。專利CN200810043454.1采用磷酸鹽或TFA鹽作為流動相。3、CN?200910134943.2的發明專利申請，公開了一種采用C18制備柱進行純化的方法，其中流動相為1％TFA/H20溶液和甲醇，5％甲醇-100％甲醇。4、CN?201310305700.7的發明專利申請，公開了一種采用C18制備柱進行純化的方法，采用的流動相為A(0.1％乙酸/水K)/B(0.1％乙酸/乙腈)。5、CN?201510083267.6的發明專利申請，公開的技術方案中采用的流動相A為純乙腈或甲醇，B相為0.01～10％v/v的三氟醋酸的水溶液或磷酸的水溶液。6、CN201611265510.7的發明專利申請公開的技術方案中，采用制備柱填料為碳載硅膠類型，流動相為含0.1％TFA的水、含0.1％TFA的乙腈和含0.1％TFA的甲醇中的一種或幾種。7、CN201711231965.1的發明專利申請公開的技術方案中，采用1％的醋酸水溶液(A相)和乙睛(B相)作為流動相。另外，中國藥物化學雜志第20卷第1期2010年2月報道西曲瑞克的固相合成中，洗脫劑為含0.09％TFA乙腈-0.1％TFA水溶液系統。以上專利文獻顯示，西曲瑞克的純化過程都采用了色譜純化系統，而使用色譜系統進行純化，收集的西曲瑞克洗脫液含有大量流動相，西曲瑞克濃度低，不利于進一步的純化或轉鹽。因此，采用色譜系統純化西曲瑞克過程中不可避免地存在溶液濃縮步驟。目前，西曲瑞克文獻資料中常用的溶液濃縮是采用旋轉蒸發儀在真空條件下將部分溶劑蒸發，過程往往需要對西曲瑞克溶液進行加熱，可能導致西曲瑞克受熱分解產生新的雜質。另外，文獻中采用醋酸水溶液-乙腈體系進行轉鹽，轉鹽效果較差，成品中可能存在三氟乙酸殘留。

三、發明內容：

本發明要解決的技術問題是：為了克服上述西曲瑞克現有純化轉鹽方法中存在的技術問題，本發明提供一種改進的西曲瑞克的轉鹽方法。本發明技術方案在使用色譜系統進行純化獲得西曲瑞克溶液后，采用反滲透壓技術，室溫條件下通過反滲透技術對西曲瑞克溶液進行濃縮，避免了加熱過程，避免濃縮過程加熱導致西曲瑞克降解的可能。同時，反滲透技術濃縮西曲瑞克溶液，效率更高。采用磷酸-乙腈體系和醋酸銨-甲醇體系對西曲瑞克中的三氟乙酸進行置換，采用醋酸-甲醇體系進行洗脫，獲得醋酸西曲瑞克。

為了解決上述問題，本發明采取的技術方案是：