[發(fā)明專利]用于鑒別甘草產(chǎn)地的SSR分子標(biāo)記引物及方法與應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202011047560.4 | 申請(qǐng)日： | 2020-09-29 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN112143826B | 公開（公告）日： | 2022-06-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王繼永;尚興樸;鄭司浩;曾燕;劉美娟;包芳;杜杰;梁煥;李進(jìn)瞳 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國中藥有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6895 | 分類號(hào)： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京知聯(lián)天下知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11594 | 代理人： | 張陸軍;張迎新 |
| 地址： | 100195 北京市海*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 鑒別 甘草 產(chǎn)地 ssr 分子 標(biāo)記 引物 方法 應(yīng)用 | ||
1.用于鑒別甘草產(chǎn)地的SSR分子標(biāo)記引物，其特征在于，
所述SSR分子標(biāo)記引物命名為GC01，由核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的下游引物組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于鑒別甘草產(chǎn)地的SSR分子標(biāo)記引物，其特征在于，所述引物的退火溫度為55℃-60℃之間，所述引物的長度在20-25bp之間，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長度在150bp-350bp之間。
3.利用權(quán)利要求1或2所述SSR分子標(biāo)記引物鑒別甘草產(chǎn)地的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
提取待鑒別甘草樣本的DNA；
以待鑒別甘草樣本的DNA為模板，用SSR分子標(biāo)記引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；
取擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述擴(kuò)增的反應(yīng)程序包括：
95℃預(yù)變性5min；95℃變性0.5min，60℃退火0.5min，72℃延伸0.5min，30次循環(huán)；72℃延伸10min。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在所述電泳檢測(cè)時(shí)，所用的凝膠為1％的瓊脂糖凝膠，電壓為140V，電泳20-30min。
6.權(quán)利要求1或2所述SSR分子標(biāo)記引物在甘草產(chǎn)地鑒別中的應(yīng)用。
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