[發明專利]豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202011044308.8
• 申請日: 2020-09-28
• 公開（公告）號: CN112415067A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 沈海燕;溫俊平;張春紅;勾紅潮;劉志成;張建民;廖明;張建峰
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院動物衛生研究所;嶺南現代農業科學與技術廣東省實驗室茂名分中心;華南農業大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/12;G01N33/543;G01N33/569
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

1.豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器，其特征在于，所述豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器由：工作電極、印刷電路板微電極板、固定于印刷電路板微電極板一側表面上的結合蛋白、連接于所述結合蛋白上的豬流行性腹瀉病毒特異性抗體組成。

2.根據權利要求1所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器，其特征在于，所述印刷電路板微電極板包括：

環氧樹脂基片；

固定在環氧樹脂基片一側表面上的若干電極，所述電極為銅電極，所述銅電極表面鍍有金涂層；

與所述若干電極相連接的線路。

3.根據權利要求2所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器，其特征在于，所述金涂層的厚度為100～105nm；所述銅電極的厚度為70～75μm。

4.根據權利要求1所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器，其特征在于，所述結合蛋白包括蛋白A。

5.根據權利要求1所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器，其特征在于，所述豬流行性腹瀉病毒特異性抗體包括豬流行性腹瀉病毒S蛋白單克隆抗體。

6.權利要求1至5任一項所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將所述印刷電路板微電極板接入所述工作電極，在所述的印刷電路板微電極板表面滴加結合蛋白，孵育，得到結合蛋白修飾的微電極板；

(2)在所述結合蛋白修飾的微電極板表面滴加豬流行性腹瀉病毒特異性抗體，孵育，即得；

其中，所述制備方法還包括在步驟(2)后在所述結合有特異性抗體的微電極板表面滴加足量封閉液。

7.基于權利要求1至5任一項所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器的豬流行性腹瀉病毒檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)在權利要求1至5任一項所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器表面滴加待測樣品和阻抗測量液，孵育，檢測加入待測樣品前后的阻抗值，建立阻抗譜；

(2)根據所述阻抗譜計算加入待測樣品前后的電子傳遞電阻統計學差異性，判斷所述待測樣品中是否含有豬流行性腹瀉病毒；

其中，所述阻抗測量液包括[Fe(CN)₆]^3-/4-溶液。

8.根據權利要求7所述的豬流行性腹瀉病毒檢測方法，其特征在于，所述判斷待測樣品中是否含有豬流行性腹瀉病毒的標準為：

若加入待測樣品前后的電子傳遞電阻無統計學差異性，則待測樣品不含豬流行性腹瀉病毒；

若否，則待測樣品含豬流行性腹瀉病毒。

9.一種豬流行性腹瀉病毒檢測設備，其特征在于，所述豬流行性腹瀉病毒檢測設備中包括權利要求1至5任一項所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器。

10.權利要求1至5任一項所述的豬流行性腹瀉病毒阻抗型免疫生物傳感器在豬流行性腹瀉病毒快速定性檢測中的應用。