[發(fā)明專利]用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA、載體、宿主細胞及方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011040617.8 | 申請日： | 2020-09-28 |
| 公開（公告）號： | CN112126646B | 公開（公告）日： | 2022-07-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 徐炎;焦博雷;郝新意;褚燕南;劉明波;劉琳;劉智銘 | 申請（專利權(quán)）人： | 西北農(nóng)林科技大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/88 |
| 代理公司： | 北京億騰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11309 | 代理人： | 陳霽 |
| 地址： | 712100 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 植物 葡萄 病毒 sgrna 載體 宿主 細胞 方法 | ||
本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及用于植物抗葡萄卷葉病毒?3的sgRNA、載體、宿主細胞及方法。所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.2所示的gattGGTGTTGATCAATTCCGTT；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ ID No.3所示的cgagAACGGAATTGATCAACACC。所述sgRNA可以用于減少植物體內(nèi)葡萄卷葉病毒?3的病毒含量，抑制葡萄卷葉病毒?3的復(fù)制，由此提高植物抗葡萄卷葉病毒?3的能力。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA、載體、宿主細胞及方法。
背景技術(shù)
葡萄卷葉病毒-3(grapevine leafroll-associated virus 3,GLRaV-3)可以導(dǎo)致葡萄發(fā)生葡萄卷葉病(Grapevine leafroll disease)，從而使得導(dǎo)致葡萄植株長勢減弱，根系發(fā)育不良，抗逆性減弱，易受凍害；枝蔓嫁接成活率顯著降低，生根能力差。
由此，亟需一種可以使植物能夠抗葡萄葡萄卷葉病毒-3的方案。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA、載體、宿主細胞及方法，可以用于提高葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的能力。
第一方面，本發(fā)明實施例提供了一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.2所示的gattGGTGTTGATCAATTCCGTT；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ ID No.3所示的cgagAACGGAATTGATCAACACC。
第二方面，本發(fā)明實施例提供了一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.5所示的gattGCTAAGGAATAGAGGGCTG；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ ID No.6所示的cgagCAGCCCTCTATTCCTTAGC。
第三方面，本發(fā)明實施例提供了一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.8所示的gattGTCGTCTTCGTACTAGCAG；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ ID No.9所示的cgagCTGCTAGTACGAAGACGAC。
第四方面，本發(fā)明實施例提供了一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.11所示的gattGTCCTTAACGTATTTTAAG；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ ID No.12所示的cgagCTTAAAATACGTTAAGGAC。
第五方面，本發(fā)明實施例提供了一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.14所示的gattGGAGCTTTGCTGTAACCTC；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ ID No.15所示的cgagGAGGTTACAGCAAAGCTCC。
第一至第五任一方面中，所述植物為葡萄。該葡萄可以為赤霞珠品種葡萄，也可以為其他品種的葡萄。
第六方面，本發(fā)明實施例提供了一種用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的重組載體，包括第一至第五任一方面所述的sgRNA。
第七方面，本發(fā)明實施例提供了一種宿主細胞，含有第一至第五任一方面所述的sgRNA或第六方面所述的重組載體。
第八方面，本發(fā)明實施例提供了一種提高植物抗葡萄卷葉病毒-3能力的方法，包括如下步驟：
制備第六方面提供的重組表達載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌；
使用含有所述重組表達載體的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化所述植物的植株，以得到對抗GLRaV-3能力提高的轉(zhuǎn)染植株。
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