[發明專利]用于植物抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA、載體、宿主細胞及方法

有效

• 申請號: 202011040617.8
• 申請日: 2020-09-28
• 公開（公告）號: CN112126646B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發明（設計）人: 徐炎;焦博雷;郝新意;褚燕南;劉明波;劉琳;劉智銘
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/88
• 代理公司: 北京億騰知識產權代理事務所(普通合伙) 11309
• 代理人: 陳霽

1.一種用于葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.2所示的gattGGTGTTGATCAATTCCGTT；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ IDNo.3所示的cgagAACGGAATTGATCAACACC。

2.一種用于葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.5所示的gattGCTAAGGAATAGAGGGCTG；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ IDNo.6所示的cgagCAGCCCTCTATTCCTTAGC。

3.一種用于葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.8所示的gattGTCGTCTTCGTACTAGCAG；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ IDNo.9所示的cgagCTGCTAGTACGAAGACGAC。

4.一種用于葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.11所示的gattGTCCTTAACGTATTTTAAG；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ IDNo.12所示的cgagCTTAAAATACGTTAAGGAC。

5.一種用于葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的sgRNA；其中，所述sgRNA序列的上游引物序列為SEQ ID No.14所示的gattGGAGCTTTGCTGTAACCTC；所述sgRNA序列的下游引物序列為SEQ IDNo.15所示的cgagGAGGTTACAGCAAAGCTCC。

6.一種用于葡萄抗葡萄卷葉病毒-3的重組載體，包括權利要求1-5任一項所述的sgRNA。

7.一種宿主細胞，含有權利要求1-5任一項所述的sgRNA或權利要求6所述的重組載體。

8.一種提高葡萄抗葡萄卷葉病毒-3能力的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

制備含有權利要求6所述的重組載體的農桿菌菌液；

使用含有所述重組表達載體的農桿菌菌液轉化所述葡萄的植株，以得到轉染植株，從所述轉染植株中得到對抗GLRaV-3能力提高的轉染植株。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述農桿菌菌液的OD₆₀₀值為1，As濃度為200mM,pH值為5.8。