[發明專利]一種高效液相色譜串聯質譜測定氯氟醚菌唑含量的方法

在審

• 申請號: 202011037300.9
• 申請日: 2020-09-28
• 公開（公告）號: CN111999419A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 王思威;孫海濱;劉艷萍;常虹;王瀟楠
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院植物保護研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 郭煒綿

本發明公開了一種高效液相色譜串聯質譜測定氯氟醚菌唑含量的方法，包括以下步驟：將檢測樣品切碎，加入40～50％的氯化鈉，離心，取上清液I；加入乙二胺?N?丙基硅烷、石墨化碳黑和十八烷基鍵合硅膠，離心，移取上清液II過微孔濾膜，采用高效液相色譜串聯質譜儀做定量分析；乙二胺?N?丙基硅烷的用量占樣品質量1～2％，乙二胺?N?丙基硅烷、石墨化碳黑與十八烷基鍵合硅膠的質量比為10:(1?2.5):(1?2.5)。本發明方法采用分散吸附劑凈化方法中PSA、GCB和C₁₈的組合可以有效地去除荔枝和龍眼全果樣品中的色素、糖類、黃酮等雜質，荔枝和龍眼全果樣品的凈化效果最好，目標峰附近干擾少，確保分析結果可靠性。

技術領域

本發明屬于儀器分析領域，具體涉及一種高效液相色譜串聯質譜測定氯氟醚菌唑含量的方法。

背景技術

三唑類殺菌劑(triazole fungicides)具有高效、低毒、持效期長、內吸性強等特點，作用機制主要為抑制致病菌細胞膜內麥角甾醇的生物合成。由于三唑類殺菌劑化學穩定性好、半衰期長、不易生物降解等特性，導致其在水體、土壤等環境介質中殘留期較長；同時，有研究證實，三唑類殺菌劑可對水生生物產生毒害作用，可見三唑類殺菌劑對環境及生物的風險性較高，且由于長期單一使用導致抗藥性顯著。

氯氟醚菌唑(mefentrifluconazole)的化學結構如下所示：

它是第一個新型異丙醇三唑類殺菌劑，作用機理為甾醇生物合成中C14-脫甲基化抑制劑(DMI)。氯氟醚菌唑具有選擇性和內吸傳導性，兼具保護、治療、鏟除作用，其分子中獨特的異丙醇基團，使得其能夠靈活地從游離態自由旋轉與靶標結合形成結合態，更好地阻止殼針孢菌的轉移，減少病菌突變，延緩抗藥性產生和蔓延，市場前景廣闊。

荔枝和龍眼是南方特有的亞熱帶水果，含有豐富的氨基酸、多酚等營養成分，是重要的功能性水果。由于南方多濕的氣候特征，導致荔枝龍眼上病害發生嚴重，且周期長，嚴重影響了荔枝龍眼的產量和質量。殺菌劑是目前荔枝龍眼上病害的主要防控措施，但由于加大施藥濃度、增加施藥次數等不合理用藥方法，導致荔枝龍眼上殺菌劑殘留顯著，對蜜蜂等有益生物慢性毒性逐級顯現，嚴重影響我國荔枝的品質、產量及出口創匯。因此，開發荔枝龍眼上殺菌劑的殘留分析方法可為殺菌劑的歸趨行為和殘留控制技術研究提供基礎。

荔枝和龍眼中殺菌劑氯氟醚菌唑的分析方法暫未見報道。荔枝和龍眼果肉中含有大量糖類、荔枝果皮含有大量色素、黃酮等雜質，氯氟醚菌唑在荔枝和龍眼中的檢測，主要涉及凈化處理，需要在滿足靈敏度條件下，最大限度將雜質去除，可避免對儀器造成污染，確保結果的可靠性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種高效液相色譜串聯質譜測定氯氟醚菌唑含量的方法。首先對凈化步驟進行優化，選取凈化效果好和提取效率高的凈化措施，然后采用高效液相色譜串聯質譜法分析氯氟醚菌唑含量，方法簡便快速、凈化效果好、回收率高。本發明通過比較不同分散凈化劑和固相萃取小柱對荔枝和龍眼全果中氯氟醚菌唑的凈化效果，選出了最優的分散劑組合及用量，滿足荔枝和龍眼中農藥殘留分析要求。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種高效液相色譜串聯質譜測定氯氟醚菌唑含量的方法，包括以下步驟：

將檢測樣品切碎，加入乙腈和檢測樣品質量40～50％的氯化鈉，離心，取上清液(命名為上清液I)；加入乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、石墨化碳黑(GCB)和十八烷基鍵合硅膠，混勻，離心，移取上清液(命名為上清液II)過微孔濾膜，然后采用高效液相色譜串聯質譜儀做定量分析；

所述的檢測樣品是水果和蔬菜；

所述的水果尤其包括荔枝和龍眼；

所述的離心，優選5000～10000rpm離心2～5min；