[發(fā)明專利]一種檢測發(fā)酵醬油制品中毛發(fā)水的方法

有效

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• 申請日: 2020-09-28
• 公開（公告）號: CN111879770B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李豐;毓志超;文永賢
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州智匯生物科技有限公司;廣州匯標(biāo)檢測技術(shù)中心
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/82
• 代理公司: 北京商專潤文專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11317
• 代理人: 莫莉萍;吳勇明

本發(fā)明公開了一種檢測發(fā)酵醬油制品中毛發(fā)水的方法，包括以下：步驟a，前處理；步驟b，第一樣液測定；步驟c，第二樣液測定；步驟d，第三樣液測定；步驟e，定性判定。本發(fā)明的檢測方法以氯丙醇作為毛發(fā)水的指示物，將氯丙醇通過反應(yīng)轉(zhuǎn)化為乙酰丙酮作為檢測目標(biāo)物，來判定醬油樣品是否含有毛發(fā)水。檢測方法操作簡便，現(xiàn)象穩(wěn)定、快速、明顯，專屬性強，靈敏度高，不需要大型的分析儀器，對實驗環(huán)境要求低，極大的降低了假陽性的情況產(chǎn)生，適用于對發(fā)酵醬油制品中是否含有毛發(fā)水進行大批量快速檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醬油檢測領(lǐng)域，特別是涉及一種檢測發(fā)酵醬油制品中毛發(fā)水的方法。

背景技術(shù)

近年來部分不法分子將毛發(fā)水解液添加到醬油等產(chǎn)品中，取代黃豆等糧食發(fā)酵，提高產(chǎn)品中虛假氨基酸類物質(zhì)含量，人工合成假醬油。這些用頭發(fā)加工成的醬油等產(chǎn)品生產(chǎn)成本低廉，在市場上具有價格競爭力，欺騙消費者。毛發(fā)水，就是利用人類或動物的毛發(fā)，由于其含有豐富的蛋白質(zhì)，經(jīng)過酸水解生產(chǎn)氨基酸液，違法添加在食品中充當(dāng)營養(yǎng)成分。2009年，衛(wèi)生部發(fā)布的《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)名單（第三批）》中明確將毛發(fā)水列入非食用物質(zhì)，重點產(chǎn)品是醬油調(diào)味料。

毛發(fā)等屬于非食品原料，而且毛發(fā)本身就含有鉛、砷等較多的有害物質(zhì)，根本就不能被用來加工食品、調(diào)味品用的原料。毛發(fā)在水解等反應(yīng)中所用的工業(yè)鹽酸，及其他試劑中也含過量砷、鉛、汞等有毒物質(zhì)。此外，在鹽酸水解植物蛋白的過程中，還會形成致癌物質(zhì)三氯丙醇等有毒有害物質(zhì)，因此這種提取了胱氨酸后的“毛發(fā)水”中，含有大量的有毒有害物質(zhì)。如果消費者食用了用這種“毛發(fā)水醬油”，可能會導(dǎo)致砷中毒及其他急、慢性毒害，對身體造成傷害。

目前檢測毛發(fā)水以氯丙醇為主要指標(biāo)，《GB 5009.191-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氯丙醇及其脂肪酸酯含量的測定》,其中第一法操作原理為:采用同位素稀釋技術(shù),以D5-3-氯-1,2-丙二醇(D5-3-MCPD)為內(nèi)標(biāo)。試樣中加入內(nèi)標(biāo),以硅藻土為吸附劑,進行固相支持液-液萃取,用正己烷-無水乙醚溶液(9+1)淋洗去除非極性脂質(zhì)成分,用無水乙醚洗脫3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)。以七氟丁酰基咪唑衍生,采用氣相色譜-質(zhì)譜儀測定,內(nèi)標(biāo)法定量。但是該方法的前處理復(fù)雜，需要使用氣相色譜-質(zhì)譜儀這種大型昂貴儀器，操作難度高，成本高，對實驗員水平要求較高，僅限于實驗室常規(guī)檢測，不利于快速檢測得到結(jié)果的目標(biāo)和要求。

因此，需要開發(fā)一種操作簡便、快速，不需要大型的分析儀器，耗時較少，專屬性強，靈敏度高，檢驗結(jié)果正確率高，分析成本低，對實驗環(huán)境要求低，適用于檢測發(fā)酵醬油制品中是否含有毛發(fā)水的快速檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種檢測發(fā)酵醬油制品中毛發(fā)水的方法。根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種檢測發(fā)酵醬油制品中毛發(fā)水的方法，包括以下：

步驟a，前處理：量取一定量的醬油樣品于容器中，加入氯化鈉、活性炭、鐵屑和水，混勻后加入無水乙醚，混合后進行離心，取上層溶液分為三等份，分別為第一樣液、第二樣液和第三樣液；

步驟b，第一樣液測定：向所述第一樣液中加入甲基氯化鎂的四氫呋喃溶液，振蕩混勻，加入第一催化劑和無水乙醚，進行磁力攪拌，過濾，得到第一待測液，向所述第一待測液中逐滴加入硝酸銀溶液，每加入一滴所述硝酸銀溶液，觀察所述第一待測液中是否生成沉淀，所述第一催化劑為鹵化亞銅化合物；

步驟c，第二樣液測定：向所述第二樣液中加入甲基氯化鎂的四氫呋喃溶液和無水乙醚，振蕩混勻，靜置，得到第二待測液，向所述第二待測液中加入硝酸銀溶液，每加入一滴所述硝酸銀溶液，觀察所述第二待測液中是否生成沉淀；

步驟d，第三樣液測定：

d1，將所述第三樣液氮氣吹干，加入氫氧化鈉溶液，振蕩混勻，靜置，得到第三待測液；

d2，向所述第三待測液中加入乙酸溶液，調(diào)節(jié)所述第三待測液的pH值為7.0±0.1；