[發明專利]包含免疫細胞的藥物組合物用于治療癌癥

有效

• 申請號: 202011018283.4
• 申請日: 2020-09-25
• 公開（公告）號: CN111920948B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 李偉強;劉歡;朱小明
• 申請（專利權）人: 安可瑞（山西）生物細胞有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61K35/17;A61P35/00;C07K16/28;C12N5/0783
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種藥物組合物，其含有單克隆抗體以及提取的免疫細胞，所述的免疫細胞為采用下述方法制備得到：

(a)將刺激因子包被培養瓶；其中刺激因子由IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL、IL-15濃度2000IU/mL、GM-CSF濃度2000IU/mL、IL-4濃度750IU/mL、TNF-α濃度1000IU/mL以生理鹽水配置組成；

(b)將血液采用密度梯度離心法分離單個核細胞；

(c)在刺激因子包被的培養瓶中添加含有亞油酸2mg/L，氨基酸20mg/L，維生素50mg/L、IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL的RPMI 1640培養基，再將單個核細胞接種于刺激因子包被的培養瓶中在37℃、二氧化碳濃度5％條件下進行培養，其中單個核細胞的接種濃度為5×10⁶個/ml；

(d)待培養3天后，將單個核細胞移入空培養瓶中，再向空培養瓶中添加含有亞油酸2mg/L，氨基酸20mg/L，維生素50mg/L、IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL的RPMI1640培養基繼續在37℃、二氧化碳濃度5％條件下進行培養；

(e)待培養7天后，將單個核細胞移入培養袋中，再向培養袋中添加含有亞油酸2mg/L，氨基酸20mg/L，維生素50mg/L、IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL的RPMI 1640培養基在37℃、二氧化碳濃度5％條件下進行培養，待培養15天后，收集單個核細胞即為所述的免疫細胞；

所述的單克隆抗體為特異性的PD-L1單克隆抗體4-G3，

4-G3的重鏈可變區序列如SEQ ID NO：1所示；

4-G3的輕鏈可變區序列如SEQ ID NO：2所示。

2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于：該藥物組合物可制成靜脈內，皮下，腹膜內，肌肉內，口服，鼻，肺，眼，陰道或直腸給藥。

3.如權利要求1所述的藥物組合物，其中藥物組合物的劑型為溶液，懸浮液，乳劑，脂質體制劑。

4.如權利要求1所述的藥物組合物，其中在藥物組合物中包括等滲劑，所述等滲劑選自糖，甘露醇，山梨醇或氯化鈉中的一種。

5.權利要求1中所述的單克隆抗體以及免疫細胞在制備用于治療肝癌的藥物組合物中的用途；其中所述免疫細胞為采用下述方法制備得到：

(a)將刺激因子包被培養瓶；其中刺激因子由IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL、IL-15濃度2000IU/mL、GM-CSF濃度2000IU/mL、IL-4濃度750IU/mL、TNF-α濃度1000IU/mL以生理鹽水配置組成；

(b)將血液采用密度梯度離心法分離單個核細胞；

(c)在刺激因子包被的培養瓶中添加含有亞油酸2mg/L，氨基酸20mg/L，維生素50mg/L、IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL的RPMI 1640培養基，再將單個核細胞接種于刺激因子包被的培養瓶中在37℃、二氧化碳濃度5％條件下進行培養，其中單個核細胞的接種濃度為5×10⁶個/ml；

(d)待培養3天后，將單個核細胞移入空培養瓶中，再向空培養瓶中添加含有亞油酸2mg/L，氨基酸20mg/L，維生素50mg/L、IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL的RPMI1640培養基繼續在37℃、二氧化碳濃度5％條件下進行培養；

(e)待培養7天后，將單個核細胞移入培養袋中，再向培養袋中添加含有亞油酸2mg/L，氨基酸20mg/L，維生素50mg/L、IL-2濃度5000IU/mL、IFN-γ濃度5000IU/mL的RPMI 1640培養基在37℃、二氧化碳濃度5％條件下進行培養，待培養15天后，收集單個核細胞。

6.一種特異性結合PD-L1的單克隆抗體，其特征在于：重鏈可變區序列如SEQ ID NO：1所示，輕鏈可變區序列如SEQ ID NO：2所示。