[發(fā)明專利]一種野生茅草菇菌絲體的固定化方法及其染料脫色應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011016010.6
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN112080488B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳慶喜;金憶文;趙錦;王曉慧
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽大學(xué)
• 主分類號: C12N11/12
• 分類號: C12N11/12;C12N11/10;C12N11/096;C02F3/34;C02F101/30;C02F103/30;C02F103/34
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司 34101
• 代理人: 盧敏

本發(fā)明公開了一種野生茅草菇菌絲體的固定化方法及其染料脫色應(yīng)用，是通過篩選合適的固定化材料對野生茅草菇菌絲體進行固定。相比較于未固定化的固體培養(yǎng)菌絲體，本發(fā)明的固定化茅草菇菌絲體微球?qū)θ玖蠌U水的脫色效率顯著提高，在幾個小時內(nèi)染料脫色率就接近100％，處理時間大大縮短，且其重復(fù)利用更加便捷，具有廣闊的應(yīng)用研究價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于染料廢水脫色領(lǐng)域，具體涉及一種具有高效去除染料功能的野生茅草菇菌絲體的固定化方法及其染料脫色應(yīng)用。

背景技術(shù)

茅草菇學(xué)名松乳菇，是一種野生真菌，營養(yǎng)豐富，具有很高的食用價值。同時，茅草菇含有乳菇紫素等抗生素成分，其子實體多糖還具有抗腫瘤、增強免疫、抗炎癥等功效，有很高的藥用價值。然而，由于茅草菇與宿主植物有著共生關(guān)系，且對生長環(huán)境有著嚴格要求，目前沒有實現(xiàn)野生茅草菇的人工馴化，價格較高。因而，對野生茅草菇及其菌絲體的高效開發(fā)利用意義重大。

染料是現(xiàn)代印染、紡織及造紙行業(yè)中應(yīng)用廣泛的活性物質(zhì)，在現(xiàn)代化工及日用品生產(chǎn)中也被大量使用，然而染料在創(chuàng)造巨大經(jīng)濟價值的同時，也帶來了一定程度的環(huán)境負荷，即污染問題，特別是對水體資源的污染。我國每年都會有大量的染料或染料中間體直接或間接的排入水體，而大部分染料的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，且具有致癌、致畸和致突變性，對人體健康和生物鏈的安全造成嚴重危害，因而如何處理體積龐大的工業(yè)染料廢水是亟待解決的一大難題。

目前，染料廢水的處理方法有化學(xué)脫色法、物理去除法及生物處理法等。其中，物理、化學(xué)法在實際應(yīng)用中有著各種不足之處，如成本高昂、副產(chǎn)物極易造成二次污染、染料脫色不徹底等問題。相比較而言，生物法則具有成本低、無二次污染、可重復(fù)利用、可持續(xù)發(fā)展等優(yōu)點。在生物法脫色處理中，固定化微生物技術(shù)經(jīng)常被應(yīng)用，該技術(shù)在染料廢水脫色利用上，除了具有上述優(yōu)點外，還可以避免微生物在廢水中大量逸散，提高細胞對廢水毒性的抵抗力等。在微生物固定化技術(shù)中，常見方法有包埋法、交聯(lián)法和吸附法。目前，生物處理法在廢水脫色領(lǐng)域中穩(wěn)步發(fā)展，固定化真菌菌絲體是一項具有很大潛力的脫色應(yīng)用技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種野生茅草菇菌絲體的固定化方法及其染料脫色應(yīng)用，目的在于使其在固定化后對染料具有更高效的脫色去除能力。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明野生茅草菇菌絲體的固定化方法，包括以下步驟：

步驟1、液體發(fā)酵培養(yǎng)

將低溫保存的野生茅草菇菌種固體平板在25-30℃恒溫培養(yǎng)箱中活化10-40min，用無菌刀片切下長寬1-4cm的菌片，在無菌環(huán)境下將其接種到液體培養(yǎng)基中，置于25-30℃恒溫搖床中，以80-160rpm的轉(zhuǎn)速振蕩培養(yǎng)3d，得到野生茅草菇的液體發(fā)酵菌絲體；

步驟2、固定化

將液體發(fā)酵菌絲體加入無菌水中，均勻打散，得到菌絲體懸液，其中液體發(fā)酵菌絲體的濕重與無菌水體積的比為1-3g：50mL；

將固定化生物材料A或固定化生物材料B加入所述菌絲體懸液中，攪拌至固定化生物材料完全溶解，得到混合懸液Ⅰ，其中固定化生物材料與所述菌絲體懸液的質(zhì)量體積比為1g：30-80mL；

將固定化生物材料B或固定化生物材料A和固化劑加入無菌水中，攪拌至溶解，得到混合液Ⅱ，其中固定化生物材料、固化劑與無菌水的質(zhì)量體積比為1-5g：1-10g：500mL；

在攪拌的同時，使用恒流注射泵將混合懸液Ⅰ勻速滴入混合液Ⅱ中，攪拌轉(zhuǎn)速100-500rpm，混合懸液Ⅰ與混合液Ⅱ的體積比為1:10；滴完后，繼續(xù)保持100-500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌固化10-30min，過濾、用無菌水沖洗，即得到固定化茅草菇菌絲體微球。

進一步地，步驟1中，所述液體培養(yǎng)基為察氏培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基中的一種或兩種。