[發(fā)明專利]一種野生茅草菇菌絲體的固定化方法及其染料脫色應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011016010.6
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN112080488B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳慶喜;金憶文;趙錦;王曉慧
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽大學(xué)
• 主分類號: C12N11/12
• 分類號: C12N11/12;C12N11/10;C12N11/096;C02F3/34;C02F101/30;C02F103/30;C02F103/34
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司 34101
• 代理人: 盧敏

1.一種野生茅草菇菌絲體的固定化方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、液體發(fā)酵培養(yǎng)

將低溫保存的野生茅草菇菌種固體平板在25-30℃恒溫培養(yǎng)箱中活化10-40min，用無菌刀片切下長寬1-4cm的菌片，在無菌環(huán)境下將其接種到液體培養(yǎng)基中，置于25-30℃恒溫搖床中，以80-160rpm的轉(zhuǎn)速振蕩培養(yǎng)3d，得到野生茅草菇的液體發(fā)酵菌絲體；

步驟2、固定化

將液體發(fā)酵菌絲體加入無菌水中，均勻打散，得到菌絲體懸液，其中液體發(fā)酵菌絲體的濕重與無菌水體積的比為1-3g：50mL；

將固定化生物材料A或固定化生物材料B加入所述菌絲體懸液中，攪拌至固定化生物材料完全溶解，得到混合懸液Ⅰ，其中固定化生物材料與所述菌絲體懸液的質(zhì)量體積比為1g：30-80mL；

將固定化生物材料B或固定化生物材料A和固化劑加入無菌水中，攪拌至溶解，得到混合液Ⅱ，其中固定化生物材料、固化劑與無菌水的質(zhì)量體積比為1-5g：1-10g：500mL；

在攪拌的同時，使用恒流注射泵將混合懸液Ⅰ勻速滴入混合液Ⅱ中，攪拌轉(zhuǎn)速100-500rpm，混合懸液Ⅰ與混合液Ⅱ的體積比為1:10；滴完后，繼續(xù)保持100-500rpm的轉(zhuǎn)速攪拌固化10-30min，過濾、用無菌水沖洗，即得到固定化茅草菇菌絲體微球；

所述固定化生物材料A為海藻酸鈉、纖維素硫酸鈉或硫酸軟骨素，所述固定化生物材料B為殼聚糖、氯化殼聚糖或ε-聚賴氨酸，所述固化劑為氯化鈣、京尼平和三聚磷酸鈉中的一種或兩種；若混合懸液Ⅰ選用固定化生物材料A，則混合液Ⅱ選用固定化生物材料B；若混合懸液Ⅰ選用固定化生物材料B，則混合液Ⅱ選用固定化生物材料A。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化方法，其特征在于：步驟1中，所述液體培養(yǎng)基為察氏培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基、馬丁氏培養(yǎng)基中的一種或兩種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化方法，其特征在于：步驟1中，所述搖床的培養(yǎng)方式為氣浴或水浴。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化方法，其特征在于：步驟2中，所述均勻打散的方法為超聲波、磁力攪拌、渦旋振蕩中的一種。

5.一種權(quán)利要求1～4任意一項所述固定化方法所獲得的固定化茅草菇菌絲體微球。

6.一種權(quán)利要求5所述固定化茅草菇菌絲體微球的染料脫色應(yīng)用，其特征在于：用于對染料廢水進行處理，實現(xiàn)廢水中染料的脫色去除。