[發明專利]一種熒光微球活化劑復溶液及其應用

有效

• 申請號: 202011013808.5
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN112143484B
• 公開（公告）日: 2022-10-21
• 發明（設計）人: 尚延平;李文葉;黃玲;張雪嬌;舒芹;趙愿安
• 申請（專利權）人: 武漢生之源生物科技股份有限公司
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;G01N33/533;G01N33/558;G01N33/58
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 黃君軍

1.一種熒光微球活化劑復溶液，所述活化劑復溶液用于溶解 EDC 和 NHS，其特征在于，所述活化劑復溶液由濃度 20～100mM MES 緩沖液和質量濃度0.5～2%的表面活性劑S22 CHEMAL LA-9 組成，其中所述 MES 緩沖液由二甲基亞砜溶解 MES 配制而成。

2.根據權利要求 1 所述的一種熒光微球活化劑復溶液，其特征在于，所述活化劑復溶液由濃度 50mM MES 緩沖液和質量濃度 1%的表面活性劑 S22 CHEMAL LA-9 組成。

3.如權利要求 1 所述的活化劑復溶液在熒光微球活化中的應用。

4.根據權利要求3所述的活化劑復溶液在熒光微球活化中的應用，其特征在于，采用如權利要求 1 所述的活化劑復溶液分別溶解 EDC 和 NHS，然后依次加入至熒光微球中進行活化，即得活化的熒光微球，其中 NHS 和 EDC 的終濃度為 0.03-0.1mg/mL。

5.一種熒光微球免疫層析試紙條，其特征在于，所述試紙條包含如權利要求 4 所述的活化的熒光微球，所述熒光微球免疫層析試紙條的制備方法如下，所述方法包括：

S1、將熒光微球溶解于微球稀釋液中，然后加入用權利要求 1 所述的活化劑復溶液分別溶解得到的 NHS 溶液和 EDC 溶液進行活化；

S2、離心去上清，將沉淀重懸，然后加入抗體進行偶聯；

S3、加入封閉劑，離心去上清，將沉淀用保存液重懸得到熒光溶液；

S4、將所述熒光溶液稀釋后噴涂于玻璃纖維素膜上，烘干得到熒光微球墊；

S5、將抗體包被于硝酸纖維素膜上，并制備樣品墊；

S6、將所述熒光微球墊、硝酸纖維素膜和樣品墊依次組裝即得所述熒光微球免疫層析試紙條。

6.一種熒光微球免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于，所述方法包括：

S1、將熒光微球溶解于微球稀釋液中，然后加入用權利要求 1 所述的活化劑復溶液分別溶解得到的 NHS 溶液和 EDC 溶液進行活化；

S2、離心去上清，將沉淀重懸，然后加入抗體進行偶聯；

S3、加入封閉劑，離心去上清，將沉淀用保存液重懸得到熒光溶液；

S4、將所述熒光溶液稀釋后噴涂于玻璃纖維素膜上，烘干得到熒光微球墊；

S5、將抗體包被于硝酸纖維素膜上，并制備樣品墊；

S6、將所述熒光微球墊、硝酸纖維素膜和樣品墊依次組裝即得所述熒光微球免疫層析試紙條。

7.根據權利要求 6 所述的制備方法，其特征在于，步驟 S1 具體為：將熒光微球溶解于微球稀釋液中至濃度為 5～10mg/mL，然后加入用權利要求 1 所述的活化劑復溶液分別溶解得到的 NHS 溶液和 EDC 溶液，至終濃度為 0.03～ 0.1mg/mL，于 28-32℃下搖床活化 20-30min。