[發明專利]一種臍帶間充質干細胞無血清培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 202011013489.8
• 申請日: 2020-09-24
• 公開（公告）號: CN111925986B
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發明（設計）人: 崔興日;吳俊昌;吳玉蘭;王水娣
• 申請（專利權）人: 深圳市一五零生命科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 深圳市壹品專利代理事務所(普通合伙) 44356
• 代理人: 周婷;江文鑫

1.一種臍帶間充質干細胞無血清培養基，其特征在于，所述無血清培養基的構成成分包括有：維生素H，轉鐵蛋白，血清白蛋白，血小板衍生生長因子，成纖維細胞生長因子，表皮生長因子，轉化生長因子，納米粒子膽固醇，芹菜素以及茉莉酮酸甲酯；其中，所述無血清培養基中維生素H的濃度為2μg/ml，轉鐵蛋白的濃度為15μg/mL，血清白蛋白的濃度為4mg/mL，血小板衍生生長因子的濃度為20ng/mL，成纖維細胞生長因子12ng/ml，表皮生長因子的濃度為20ng/mL，轉化生長因子的濃度為15ng/mL，納米粒子膽固醇的濃度為10μg/mL，所述芹菜素的濃度為20μg/mL，所述茉莉酮酸甲酯的濃度為9-15μg/mL。

2.如權利要求1所述的臍帶間充質干細胞無血清培養基，其特征在于，所述無血清培養基中茉莉酮酸甲酯的濃度為11.09μg/mL。

3.一種臍帶間充質干細胞無血清培養基的制備方法，其特征在于，取DMEM低糖培養基，加入維生素H、轉鐵蛋白、血清白蛋白、血小板衍生生長因子、成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、轉化生長因子、納米粒子膽固醇、芹菜素和茉莉酮酸甲酯，攪拌均勻，經濾膜過濾除菌，得到間充質干細胞的無血清培養基；其中，所述無血清培養基中維生素H 的濃度為2μg/ml，轉鐵蛋白的濃度為15μg/mL，血清白蛋白的濃度為4mg/mL，血小板衍生生長因子的濃度為20ng/mL，成纖維細胞生長因子12ng/ml，表皮生長因子的濃度為20ng/mL，轉化生長因子的濃度為15ng/mL，納米粒子膽固醇的濃度為10μg/mL，所述芹菜素的濃度為20μg/mL，所述茉莉酮酸甲酯的濃度為9-15μg/mL。

4.如權利要求3所述的臍帶間充質干細胞無血清培養基制備方法，其特征在于，培養基的致畸耐受特性測試中，致畸風險的化合物選定沙利度胺，無致畸風險的化合物選擇葉酸。

5.如權利要求3所述的臍帶間充質干細胞無血清培養基制備方法，其特征在于，培養基中的茉莉酮酸甲酯制備方法為利用雙鍵在多相加氫催化劑作用下，催化含α，β雙鍵的茉莉酮酸甲酯加氫生成順式-二氫茉莉酮酸甲酯。

6.如權利要求3所述的臍帶間充質干細胞無血清培養基制備方法，其特征在于，培養基中芹菜素可由芹菜甙酸化脫糖制得，以柚皮甙為原料進行半合成制備；在制備過程中使用吡啶作為反應溶劑，單質碘作為氧化劑。