[發(fā)明專利]一種凝血激活檢測(cè)試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011012050.3
• 申請(qǐng)日: 2020-09-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112126673A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳文亞;毛倫林;季莉莉;馬愛(ài)金;劉志清;王利惠;張金;王佳佳;黃婷婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 常州市武進(jìn)人民醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/56
• 分類號(hào): C12Q1/56
• 代理公司: 六安市新圖匠心專利代理事務(wù)所(普通合伙) 34139
• 代理人: 朱小杰

本發(fā)明涉及凝血檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種凝血激活檢測(cè)試劑盒，解決了現(xiàn)有技術(shù)中存在的由于試劑盒的存儲(chǔ)條件較高，其檢測(cè)時(shí)試劑容易受運(yùn)輸存儲(chǔ)影響導(dǎo)致自身的血凝活性較差，且檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)時(shí)的速率較低，效率低下的缺點(diǎn)，包括試劑一、試劑二、稀釋液、功能劑及終止液；試劑一包括凝血酶、肝素、阿司帕坦及緩沖液；試劑二包括凝血酶的發(fā)色底物及緩沖液；稀釋液為生理鹽水；功能劑為甘草酸苷粉末。本發(fā)明通過(guò)加入的阿司帕坦來(lái)與原本的凝血酶及肝素進(jìn)行協(xié)同作用保證試劑的穩(wěn)定性，在各類存儲(chǔ)條件下均可保證血凝活性，方便該試劑盒的使用運(yùn)輸存儲(chǔ)，且設(shè)置有功能劑，利用稀釋配比后的功能劑可有效提升檢測(cè)速率，提高檢測(cè)盒的使用效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及凝血檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種凝血激活檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)

抗凝血酶國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由英國(guó)國(guó)家生物制品檢定所(NIBSC)制備和賦值。根據(jù)該機(jī)構(gòu)提供的信息，國(guó)際衛(wèi)生組織(WHO)于1978年確立的第一代國(guó)際參考品(72/1)，使用的名稱為抗凝血酶Ⅲ。命名遵循了SeegersWH，JohnsonJF，F(xiàn)ellC(1954)的出版物《凝血酶原激活的抗凝血酶反應(yīng)》Am.J.Physiol.176(1)：97-103。在這篇文章中有四種抗凝血酶的說(shuō)法，抗凝血酶Ⅲ這一叫法我們現(xiàn)在稱之為抗凝血酶。國(guó)際血栓與止血學(xué)會(huì)(ISTH)現(xiàn)在已將術(shù)語(yǔ)命名為抗凝血酶，不再使用抗凝血酶Ⅲ。因此NIBSC制備并由WHO于1994年確立的第二代國(guó)際參考品(93/578)、2010年確立的第三代(08/258)國(guó)際參考品已經(jīng)不再使用“抗凝血酶Ⅲ”這一名稱，而使用了“抗凝血酶”的名稱。

盡管國(guó)際上已經(jīng)將術(shù)語(yǔ)、國(guó)際參考品進(jìn)行了名稱統(tǒng)一，但根據(jù)國(guó)內(nèi)的注冊(cè)情況，本申請(qǐng)仍采用了抗凝血酶Ⅲ測(cè)定試劑盒(發(fā)色底物法)進(jìn)行命名。人體內(nèi)與凝血系統(tǒng)功能相拮抗的是抗凝血系統(tǒng)，在正常情況下，兩者保持動(dòng)態(tài)平衡，從而維持血液在血管內(nèi)的正常流動(dòng)。抗凝血酶Ⅲ是抗凝系統(tǒng)中最重要的成分，它由肝臟合成，為一種多功能的絲氨酸蛋白酶抑制物，可抑制凝血酶生成，具有強(qiáng)大的抗凝活性，占血漿抗凝酶活性的70％，在運(yùn)用凝血激活檢測(cè)試劑盒的過(guò)程中，由于試劑盒的存儲(chǔ)條件較高，其檢測(cè)時(shí)試劑容易受運(yùn)輸存儲(chǔ)影響導(dǎo)致自身的血凝活性較差，且檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)時(shí)的速率較低，效率低下。

因此，我們提出了一種凝血激活檢測(cè)試劑盒用于解決上述問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，而提出的一種凝血激活檢測(cè)試劑盒。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提出的一種凝血激活檢測(cè)試劑盒，包括試劑一、試劑二、稀釋液、功能劑及終止液；所述試劑一包括濃度為9～18IU/ml凝血酶、含量為0.5～1.5wt％的肝素、含量為0.8～1.2wt％的阿司帕坦及緩沖液；所述試劑二包括含量為0.8～1.5wt％的凝血酶的發(fā)色底物及緩沖液；所述稀釋液為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9％～1.5％的生理鹽水；所述功能劑為甘草酸苷粉末；所述終止液為50wt％的醋酸。

優(yōu)選的，所述試劑一中，凝血酶的濃度為13IU/ml、肝素的含量為0.9wt％、阿司帕坦的含量為1.1wt％。

優(yōu)選的，所述試劑二中，凝血酶的發(fā)色底物的含量為1.2wt％。

優(yōu)選的，所述生理鹽水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.4％。

優(yōu)選的，所述發(fā)色底物為S2238、S-2160和Chromozym TH中的一種，所述緩沖液為T(mén)ris緩沖液。

優(yōu)選的，一種應(yīng)用凝血激活檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

S1：將全血樣品于室溫放置2～4小時(shí)或于1000xg離心20～40分鐘，取上清液，并利用稀釋液進(jìn)行稀釋；

S2：取出試劑盒，將其平衡至室溫條件，將所有試劑及S1中的上清液緩慢均衡至室溫；