[發明專利]基于細胞代替熒光編碼微球檢測HCG的方法在審
| 申請號： | 202011000579.3 | 申請日： | 2020-09-22 |
| 公開（公告）號： | CN112114157A | 公開（公告）日： | 2020-12-22 |
| 發明（設計）人： | 宮曉群;韓厚玉;常津;崔警予 | 申請（專利權）人： | 天津大學 |
| 主分類號： | G01N33/76 | 分類號： | G01N33/76;G01N33/554;G01N33/58 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人： | 程小艷 |
| 地址： | 300072*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 細胞 代替 熒光 編碼 檢測 hcg 方法 | ||
【權利要求書】：
1.基于細胞代替熒光編碼微球檢測HCG的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)細胞固定，孵育HCG包被抗體到細胞膜；
(2)加入HCG抗原及標記了FITC的標記抗體，形成三明治夾心結構，在激發光490nm，發射光525nm下用熒光倒置顯微鏡可見細胞膜有一層綠色熒光；
(3)在流式細胞儀下FITC通道收集熒光強度。
2.根據權利要求1所述的基于細胞代替熒光編碼微球檢測HCG的方法，其特征在于，細胞選取乳腺癌細胞、K562、Hela或HEK293。
3.根據權利要求1或2所述的基于細胞代替熒光編碼微球檢測HCG的方法，其特征在于，用于檢測HCG時所標記抗體的方法是用EDC活化羧基，細胞膜蛋白和抗體氨基和羧基共價連接，連接包括以下步驟：
首先，細胞培養，在傳代的時候鋪12孔板104個，隔兩天固定，4％的多聚甲醛在37度固定30分鐘；
然后，在黑暗條件下加EDC，其終濃度0.1M以及包被抗體，其終濃度0.13mg/ml，在PBS中反應。
4.根據權利要求1所述的基于細胞代替熒光編碼微球檢測HCG的方法，其特征在于，用于檢測檢測HCG時包被抗體和細胞孵育的最適時間是30分鐘。
5.根據權利要求1所述的基于細胞代替熒光編碼微球檢測HCG的方法，其特征在于，檢測的方法是用熒光倒置顯微鏡和流式細胞儀在FITC通道下進行定性和定量檢測。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于天津大學，未經天津大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202011000579.3/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
