[發明專利]一種烏頭堿類植物毒素的定性定量檢測方法

有效

• 申請號: 202010991728.0
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112304919B
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 劉國坤;王維禮;盧江龍;顧家鐳;田中群
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心;廈門大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/28
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;姜謐

本發明公開了一種烏頭堿類植物毒素的定性定量檢測方法，包括如下步驟：(1)將烏頭堿、中烏頭堿、次烏頭堿和混合烏頭堿的不同濃度的標準溶液分別與銀納米粒子溶膠混合均勻，然后加入無機鹽的溶液，獲得標準待測液；(2)使用拉曼光譜儀檢測上述標準待測液，記錄特征峰的位置和強度；(3)將待測樣品按照與步驟(1)相同的方法獲得樣品待測液，使用拉曼光譜儀檢測該樣品待測液，記錄特征峰的位置和強度，根據步驟(2)對待測樣品中的烏頭堿類植物毒素的種類進行定性和定量分析。本發明具有檢測過程簡單快速、響應迅速、檢測成本低廉、檢測靈敏度高等優勢，能夠滿足對植物毒素現場檢測的實際需求。

技術領域

本發明屬于拉曼檢測技術領域，具體涉及一種烏頭堿類植物毒素的定性定量檢測方法。

背景技術

烏頭堿是環境中廣泛存在的一類具有高毒性的植物毒素，通過食物、皮膚接觸等途徑進入人體后，會產生嚴重的中毒反應，甚至危及生命。烏頭堿類植物毒素常用的檢測方法高效液相色譜法、液相色譜串聯質譜法和氣相色譜-質譜法等，然而這些方法所需設備昂貴，操作復雜并且檢測耗時較長，難以滿足時時在線監測和現場應急檢測的實際需要，限制了它們的廣泛應用。因此，發展經濟高效和快速靈敏，烏頭堿類植物毒素的檢測方法對于食品安全和環境科學領域是至關重要的。

表面增強拉曼光譜(SERS)技術由于成本低、靈敏度高、操作簡單等優勢，已經在生物分析、環境監測和食品科學等領域得到廣泛的應用。現有技術公開的SERS技術檢測生物堿類植物毒素的相關研究主要集中于異喹啉衍生物類和莨菪烷衍生物類，且檢出限較低。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術缺陷，提供一種烏頭堿類植物毒素的定性定量檢測方法。

本發明的技術方案如下：

一種烏頭堿類植物毒素的定性定量檢測方法，包括如下步驟：

(1)將烏頭堿、中烏頭堿、次烏頭堿和混合烏頭堿的不同濃度的標準溶液分別與濃度為1.4-1.6×10^-8M的銀納米粒子溶膠混合均勻，然后加入濃度為0.9-1.1M的含Br-或I-的無機鹽的溶液，獲得標準待測液；標準溶液、銀納米粒子溶膠和無機鹽的溶液的體積比為180-220∶45-55∶45-55，銀納米粒子溶膠的粒徑為20-160nm；

(2)使用拉曼光譜儀檢測上述標準待測液，記錄特征峰的位置和強度，

根據529cm^-1和663cm^-1處的特征峰確定中烏頭堿，

根據517cm^-1、830cm^-1和859cm^-1處的特征峰定性次烏頭堿，

根據310cm^-1和344cm^-1處的特征峰的相對強度I₃₁₀∶I₃₄₄來進一步對烏頭堿、中烏頭堿和次烏頭堿進行定型分析，其中，當I₃₁₀∶I₃₄₄＝2.0-1.6∶1時為烏頭堿，當I₃₁₀∶I₃₄₄＝0.9-0.7∶1為中烏頭堿，當I₃₁₀∶I₃₄₄＝0.6-0.4∶1時為次烏頭堿，

615cm^-1處的特征峰為烏頭堿、中烏頭堿和次烏頭堿所共有，據此以混合烏頭堿對應的標準溶液的濃度的對數為橫坐標，對應615cm^-1處的特征峰的強度為縱坐標，繪制標準曲線，并獲得其線性方程；

(3)將待測樣品按照與步驟(1)相同的方法獲得樣品待測液，使用拉曼光譜儀檢測該樣品待測液，記錄特征峰的位置和強度，根據步驟(2)對待測樣品中的烏頭堿類植物毒素的種類進行定性，將該步驟獲得的615cm^-1處的特征峰的強度代入步驟(2)所得的線性方程中，對待測樣品中的烏頭堿類植物毒素進行定量。