[發明專利]一種鑒定金錢魚遺傳性別的特異性分子標記及其引物和應用

有效

• 申請號: 202010986812.3
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112029843B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 黃遠青;江東能;李廣麗;奧馬爾·法魯克·穆斯塔法;黃洋;朱春華;陳華譜;鄧思平;石紅娟;彭友幸
• 申請（專利權）人: 廣東海洋大學
• 主分類號: C12Q1/6879
• 分類號: C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

本發明公開了一種鑒定金錢魚遺傳性別的特異分子標記及其引物和應用，所述分子標記為兩條在金錢魚X染色體和Y染色體中部分同源的DNA片段，X染色體上部分同源DNA片段核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，Y染色體上部分同源DNA片段核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。本發明從金錢魚基因組信息中篩選到兩條在金錢魚X染色體和Y染色體上部分同源DNA片段，并設計特異性引物進行金錢魚遺傳性別鑒定，可以快速、準確地區分金錢魚遺傳性別。本發明的方法適用于實驗室或水產養殖企業準確鑒定金錢魚遺傳性別，還可用于對不同生長階段和不同群體的金錢魚性別鑒定和篩選，對研究金錢魚性別決定和分化機制、實現其性別控制具有重要意義。

技術領域

本發明屬于生物技術領域。更具體地，涉及一種鑒定金錢魚遺傳性別的特異分子標記及其引物和應用。

背景技術

魚類的性別決定、分化機制和性別控制技術育種在水產養殖研究和應用方面意義重大，許多魚類具有性別二態性。如有的魚類具有性別生長二態性，單性養殖可以提高效率。半滑舌鰨(Cynoglossus?semilaevis)(陳松林等,2013)和鯉魚(Cyprinus?carpio)(Jiang?et?al,2020)等雌性生長速度顯著快于雄性，全雌化養殖是提高其養殖產量的關鍵技術之一；尼羅羅非魚(Oreochromis?niloticus)(Chen?et?al.,2017)和黃顙魚(Pelteobagrus?fulvidraco)(Dan?et?al.,2018)等魚類雄性在生長上顯著優于雌性，全雄化養殖以增加產量和效益。有的魚類某種性別具有重要價值，如鱘魚卵可生產魚子醬，因此雌魚比雄魚經濟價值高(東天等,2015)。因此，根據魚類雌雄經濟性狀的性別差異，開展性別控制育種具有重要價值。

金錢魚(Scatophagus?argus)為廣鹽性亞熱帶中小型魚類，雜食性，雌、雄魚最小性成熟年齡為1齡，一般為2齡。群體繁殖期為4-8月，5-7月為盛，海水池塘或網箱養殖一年即可上市。金錢魚味道鮮美，肉質細嫩，在我國沿海及東南亞等地有廣闊的市場，目前市場價格達80-120元/公斤。金錢魚具有明顯的雌雄生長差異，人工養殖條件下，1齡雌魚生長速度比雄魚快30％左右，2齡雌魚則高于同齡雄魚100％以上(蔡澤平等,2010)。因此，金錢魚全雌化養殖可明顯提高養殖效率。金錢魚還是一種人們喜愛的觀賞魚，雄性比雌性體色艷麗，全雄金錢魚具有更高觀賞價值，但目前還未見單性苗種培育報道。要實現性別控制，需開展性別決定分子機理基礎理論研究。由于魚類性別的可塑性，理論上可以通過雄性類固醇激素、抗雌藥物和芳香化酶(雌激素合成關鍵酶)抑制劑處理，誘導遺傳性別XX的個體發育為偽雄魚(遺傳上仍為XX)，將XX偽雄魚與正常XX雌魚交配繁殖，最終獲得全雌后代，實現金錢魚全雌單性苗種培育。同樣，可以通過雌激素處理，誘導XY個體發育為偽雌魚(遺傳上仍為XY)，將XY偽雌魚與XY正常雄魚交配，獲得四分之一的YY超雄魚，YY超雄魚與正常雌魚交配，可實現全雄苗種培育用于觀賞。

傳統的魚類性別控制育種通過測交來判斷親本基因型，耗時耗力，而基于性別連鎖的分子標記，可以簡單快速地實現遺傳性別，大大節省人力物力，雖然已有與金錢魚遺傳性別相關的特異分子標記公布，但該標記需要對PCR擴增產物進行Sanger測序，檢測成本較高，且耗時相對長。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的之一在于提供一種鑒定金錢魚遺傳性別的特異分子標記，本發明的目的之二在于提供所述特異分子標記在制備鑒定金錢魚性別引物中的應用，本發明的目的之三在于提供一對能夠PCR擴增出所述特異分子標記或其部分片段的引物，本發明的目的之四在于提供所述特異分子標記或所述引物在鑒定金錢魚遺傳性別中的應用，本發明的目的之五在于提供所述特異分子標記或所述引物在制備鑒定金錢魚性別試劑盒中的應用，本發明的目的之六在于提供一種快速鑒定金錢魚遺傳性別的方法，本發明的目的之七在于提供一種鑒定金錢魚遺傳性別的試劑盒。

為達到上述目的，本發明提供如下技術方案：