[發明專利]一種鑒定金錢魚遺傳性別的特異性分子標記及其引物和應用

有效

• 申請號: 202010986812.3
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112029843B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 黃遠青;江東能;李廣麗;奧馬爾·法魯克·穆斯塔法;黃洋;朱春華;陳華譜;鄧思平;石紅娟;彭友幸
• 申請（專利權）人: 廣東海洋大學
• 主分類號: C12Q1/6879
• 分類號: C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

1.擴增特異分子標記的引物在制備鑒定金錢魚性別試劑盒中的應用，其特征在于，所述特異分子標記為兩條在金錢魚X染色體和Y染色體中部分同源的DNA片段，X染色體上部分同源的DNA片段核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示，Y染色體上部分同源的DNA片段核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示；所述引物的正向引物核苷酸序列如SEQ?IDNO：3所示，反向引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO：4所示。

2.一種快速鑒定金錢魚遺傳性別的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1.提取待測樣本基因組DNA；

S2.設計權利要求1中所述的引物并以S1的基因組DNA為模板，PCR擴增權利要求1中所述的特異分子標記，得到PCR擴增產物；

S3.將S2的PCR擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳；

S4.根據電泳結果判斷金錢魚遺傳性別，判斷標準為：

如果PCR擴增產物只有一條條帶，則待測樣本為雌魚；

如果PCR擴增產物有兩條條帶，則待測樣本為雄魚。

3.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述PCR擴增的體系為2×PCR?mix?25μL，10μmol/L正反向引物各1μL，基因組DNA?2μL，ddH₂O?21μL，共50μL。

4.根據權利要求2所述方法，其特征在于，所述PCR擴增的程序：94℃?3min；94℃?30s、58℃?30s、72℃?1min，37個循環；72℃?10min延伸。