[發(fā)明專利]包蟲絲氨酸蛋白酶抑制劑在包蟲病鑒別診斷中的應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010986287.5
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112034156A
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張文寶;李軍;田夢蕭;齊文靜;郭寶平;郭剛;臧曉燕;包建玲
• 申請（專利權(quán)）人: 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;C07K14/81;C12N15/15;C12N15/70
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 任鳳華

本發(fā)明公開了重組蛋白在棘球絳蟲包蟲病鑒別診斷中的應(yīng)用。本發(fā)明所要保護(hù)的一個技術(shù)方案是重組蛋白在制備泡型包蟲病或/和囊型包蟲病診斷抗原中的應(yīng)用。所述重組蛋白為重組蛋白rEmSPNxj或重組蛋白rEgSPNxj，所述重組蛋白rEmSPNxj的氨基酸序列是序列表中序列4的蛋白質(zhì)或氨基酸序列是序列4的第8?342位的蛋白質(zhì)。實驗證明使用制備的重組蛋白rEmSPNxj作為包蟲病抗原對泡型包蟲病患者的診斷敏感性為92.5％,分別比常用診斷包蟲病的抗原EM18和NAgB的敏感性高出4％和13.5％；診斷的特異性為100％。重組蛋白rEmSPNxj可應(yīng)用于制備泡型包蟲病的診斷抗原。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及包蟲絲氨酸蛋白酶抑制劑在包蟲病鑒別診斷中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

包蟲病(Echinococcosis)是由棘球絳蟲幼蟲寄生于人及某些動物體內(nèi)所致的一種嚴(yán)重的人畜共患寄生蟲疾病。95％以上的包蟲病例為細(xì)粒棘球蚴(Echinococcusgranulosus,E.g)感染所致的囊型包蟲病(Cystic Echinococcosis,CE)，另外一種危害很嚴(yán)重的是由多房棘球絳蟲(Echinococcus multilocularis，E.m)感染所致泡型包蟲病(Alveolar Echinococcosis，AE)是其幼蟲寄生于人體所致的一種致死性寄生蟲病，呈世界性分布。AE危害嚴(yán)重，幾乎原發(fā)于肝臟，有“蟲癌”之稱，未經(jīng)治療的AE病人10年病死率高達(dá)95％。

絲氨酸蛋白酶抑制劑(serine protease inhibitor，Serpin)是蛋白酶抑制劑超家族中的一類蛋白酶，是一類分子質(zhì)量在40～50kD的蛋白酶抑制劑，它廣泛存在于多細(xì)胞動物和植物界中。在植物、動物、病毒和微生物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了幾百種Serpin，所有的Serpin都一個共同的保守結(jié)構(gòu)—螺旋狀反應(yīng)位點(RSL)，目標(biāo)蛋白酶通過裂解RSL內(nèi)部P1和P1′殘基的肽鍵，使RSL裂解。Serpin參與到許多基本的生理學(xué)反應(yīng)中，如血液凝固、(血)纖維蛋白溶解作用、炎癥、信號級聯(lián)放大、免疫應(yīng)答、腫瘤抑制和荷爾蒙的傳導(dǎo)。多房棘球絳蟲(E.m)中分離到Serpin基因是扁形動物門中第一個發(fā)現(xiàn)的絲氨酸蛋白酶抑制劑超家族，其氨基酸序列沒有N末端的糖基化位點。目前針對于棘球絳蟲分泌Serpin的研究還相對較少,尤其在對兩型包蟲病的診斷方面沒有研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題為如何有效的對棘球絳蟲泡型包蟲病或/和囊型包蟲病進(jìn)行診斷。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了重組蛋白的下述任一種應(yīng)用：

P1、所述重組蛋白在制備泡型包蟲病或/和囊型包蟲病診斷抗原中的應(yīng)用；

P2、所述重組蛋白在制備泡型包蟲病或/和囊型包蟲病診斷試劑中的應(yīng)用；

P3、所述重組蛋白在制備泡型包蟲病或/和囊型包蟲病診斷試劑盒中的應(yīng)用；

P4、所述重組蛋白在制備檢測泡型包蟲病抗體或/和囊型包蟲病抗體的試劑盒中的應(yīng)用；

P5、所述重組蛋白在制備泡型包蟲病或/和囊型包蟲病診斷試紙中的應(yīng)用；

P6、所述重組蛋白在制備檢測泡型包蟲病抗體或/和囊型包蟲病抗體的試紙中的應(yīng)用；

P7、所述重組蛋白在制備抗泡型包蟲病或/和囊型包蟲病抗體中的應(yīng)用；

所述重組蛋白為重組蛋白rEmSPNxj或重組蛋白rEgSPNxj；

所述重組蛋白rEgSPNxj是如A1)、A2)A3)或A4)的蛋白質(zhì)：

A1)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白質(zhì)，

A2)氨基酸序列是序列表中序列3的第8-355位的蛋白質(zhì)，