[發明專利]一種高效分離脂肪源前體細胞的方法及其應用在審
| 申請號： | 202010985932.1 | 申請日： | 2020-09-18 |
| 公開（公告）號： | CN112080462A | 公開（公告）日： | 2020-12-15 |
| 發明（設計）人： | 楊嘉 | 申請（專利權）人： | 昆明學院 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077;A61K35/35;A61P17/00;A61P39/00 |
| 代理公司： | 云南凌云律師事務所 53207 | 代理人： | 董建國 |
| 地址： | 650000 云南*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高效 分離 脂肪 體細胞 方法 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種高效分離脂肪源前體細胞的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1）從人體皮下獲取 9mm 3~21mm3的脂肪組織塊；
2）脂肪組織塊用75%酒精沖洗1~2次，擦拭干凈；
3）將脂肪組織塊放入小燒杯中，用眼科剪反復剪切組織至似糊狀；
4）少量基礎培養液，送入CO 2培養箱內靜置1~2天；
5)加入足夠的基礎培養液，培養4~6天，轉移到干凈的離心管中，取400g，離心10分鐘；
棄上清，收集下層組織沉淀；
6）用PBS溶液輕緩漂洗組織沉淀物2～4次；
7）加入3-5ml的0.25％胰蛋白酶溶液于35～38℃條件下消化3～6min，加入基礎培養液終止消化，離心10分鐘；
8）棄上清，使用10倍沉淀體積的DMEMF/12培養液重懸沉淀組織，使用40微米的濾膜過濾；
9）重懸混勻上述過濾液，使用10~20微米的濾膜再一次進行過濾；
10）離心上述步驟9）的組織過濾液，5~7分鐘，收集離心后的沉淀物，使用細胞培養液吹散重懸細胞。
2.一種利用如權利1所述的高效分離脂肪源前體細胞方法所獲得的脂肪源前體細胞，其特征在于，該脂肪源前體細胞可用于組織修復。
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