[發明專利]一種梨果實中可溶性糖酸的定性檢測方法

有效

• 申請號: 202010985806.6
• 申請日: 2020-09-18
• 公開（公告）號: CN112067724B
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發明（設計）人: 張紹鈴;樊進補;謝智華;黃小三;殷豪;吳靜貽;蒙小玉;張蘇玲;王利斌;齊開杰
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/78;G01N30/88;G01N30/34;G01N30/14
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 代芳

本發明提供了一種梨果實中可溶性糖酸的定性檢測方法，屬于有機檢測技術領域。本發明中可溶性糖酸的測定采用超高效液相色譜檢測(UPLC)，本發明通過精確限定了超高效液相色譜檢測的條件，實現了可溶性糖和有機酸的定性檢測，且該方法中可溶性糖的測定可控制在14min內出峰完全，有機酸的測定可控制在5min內出峰完全，比目前常規的高效液相色譜法(HPLC)(可溶性糖在20min出峰，有機酸在15min出峰)更節約時間，自動化程度高、重復性好，可推廣到今后果實糖酸含量及組分的研究中，能夠實現梨果實中糖酸含量大批量檢測。

技術領域

本發明涉及有機檢測技術領域，尤其涉及一種梨果實中可溶性糖酸的定性檢測方法。

背景技術

梨屬于薔薇科(Rosaceae)梨亞科(Pomaceae)梨屬(Pyrus)植物，是世界上重要的落葉果樹之一。在我國，梨是繼蘋果和柑橘之后的第三大水果。糖酸是果實內在品質的重要組成部分，其種類、含量及比例對果實的商品價值及口感風味起著決定性作用，一直以來深受人們關注，也是廣大科研工作者一直致力于改良的重要指標之一。對梨果實中糖酸含量及組分的研究，有助于了解梨果實內在品質的形成因素及不同品種間糖酸含量和組分的差異，從而篩選出品質優良的親本，加快育種進程。

現有的梨果實糖酸定性檢測方法有蒽酮比色法、菲林試劑比色法、高效毛孔管電泳法、二硝基水楊酸法、氫氧化鈉滴定法和高效液相色譜法(HPLC)，但它們存在檢測時間長的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種梨果實中可溶性糖酸的定性檢測方法。本發明提供的定性檢測方法能夠實現可溶性糖酸的具體種類的快速定性測定。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種梨果實中可溶性糖酸的定性檢測方法，所述糖包括果糖、山梨糖醇、葡萄糖和蔗糖，所述酸為有機酸，所述有機酸包括草酸、奎寧酸、蘋果酸、莽草酸和檸檬酸，包括以下步驟：

將梨果實樣品、水和研磨介質混合后依次進行研磨、浸提、加熱和自然冷卻至室溫，得到待測液；

將所述待測液進行第一超高效液相色譜檢測，得到梨果實樣品中可溶性糖的種類，所述第一超高效液相色譜檢測的條件包括：

高效液相條件包括：色譜柱：UPLCACQUITYBEHAmide；流動相：乙腈-氨水混合液與水按照體積比85:15組成，所述乙腈-氨水混合液中氨水的質量分數為1％，流速：0.2mL·min^-1，柱溫：45℃，進樣時間：15min，進樣體積：2μL；

檢測條件包括：ELSD檢測器，氣體壓力：25Psi，漂移管溫度：55℃，噴霧器：25℃；

將所述待測液進行第二超高效液相色譜檢測，得到梨果實樣品中有機酸的種類，所述第二超高效液相色譜檢測的條件包括：

高效液相條件包括：色譜柱：ACQUITYUPLCHSST3；流動相：磷酸二氫鉀溶液-甲醇，所述流動相中磷酸二氫鉀的濃度為20mmol/L，甲醇的質量分數為1％，所述流動相的pH值＝2.4，流速：0.25mL·min^-1，柱溫：30℃，進樣時間：5min，進樣體積：2μL；

檢測條件包括：PDA檢測器，波長：214nm。

優選地，所述梨果實樣品與水的用量比為0.5～1.0g：2～4mL。

優選地，所述研磨介質為陶瓷珠，所述陶瓷珠的粒徑為2～3mm。

優選地，所述研磨的轉速為6～8m·s^-1，時間為45～60s。

優選地，所述浸提在超聲條件下進行，所述浸提的時間為15～20min。

優選地，所述加熱的溫度為80～90℃，所述加熱的保溫時間為30～35min。