[發明專利]霍氏腸桿菌噬菌體YZU.P.A-5及其應用

有效

• 申請號: 202010981364.8
• 申請日: 2020-09-17
• 公開（公告）號: CN112094820B
• 公開（公告）日: 2021-12-07
• 發明（設計）人: 楊振泉;陳曹偉;周文淵;高璐;鄭香峰;袁磊;饒勝其
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A01N63/40;A01P1/00;C11D3/38;C11D3/48;C12R1/92
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

本發明公開了霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)噬菌體YZU.P.A?5及其用途，該噬菌體經鑒定具有獨特的基因組結構特征，屬于一種新型噬菌體，已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏時間為2020年6月15日，保藏編號為CCTCC NO：M 2020206。本發明獲得高效裂解霍氏腸桿菌的噬菌體，能夠有效抑制各種基質中的霍氏腸桿菌，可以應用于制備控制霍氏腸桿菌污染的抑菌劑。本發明制備的抑菌劑能夠在培養基、食物基質中有效控制霍氏腸桿菌的生長，同時可以有效抑制設備、器皿、原料固體表面霍氏腸桿菌菌膜形成，并且制備簡單，使用方便，可降低霍氏腸桿菌傳播和引發食源性疾病的風險。

技術領域

本發明屬于生物工程領域，具體涉及一種霍氏腸桿菌噬菌體YZU.P.A-5及其作為生物抗菌劑在食品生產、貯藏環境中的抑菌應用。

背景技術

霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)屬于腸桿菌科(Enterobacteriaceae)腸道菌群75(未知腸桿菌雜交群，本群包括23株菌，75為菌群代碼)，是一種重要的人獸共患的條件致病菌，廣泛分布于人和動物腸道和自然環境，在特定條件下會引起動物和人感染。研究顯示，該菌引起動物呼吸系統疾病、新生兒感染引發的敗血癥病例已在多個國家和地區爆發，并且該菌逐漸呈現耐藥性趨勢。獲得廉價、環境友好的新型生物抑菌劑，減除食品生產、加工與貯藏環境與設施以及食品原料中霍氏腸桿菌污染，對于控制該菌引起的疾病具有十分重要的意義。

目前用于控制食品生產環境中細菌生長的抑菌劑主要有化學殺菌劑，但是化學殺菌劑殘留對人畜安全和環境具有重要影響，并且霍氏腸桿菌在適應自然環境生長過程中，在食品環境及加工器具的表面形成生物被膜，被膜內的細菌對常規殺菌劑的抵抗能力提高數百倍，很難被清除，從而導致持續性污染，給食品安全帶來嚴重危害。近年來，出于對食品綠色殺菌的需求，人們利用從動植物、微生物中提取的天然抗菌成分作為生物抑(減)菌劑，主要包括大蒜素、茶多酚、溶菌酶、乳酸鏈球菌素等，這些抑菌劑對人畜安全無害、雖能滿足綠色環保需求，但是存在制造成本高、導致食品風味和品質改變、殺菌效果不佳等缺陷，因此亟需開發新型生物抑菌劑。

噬菌體具有宿主專一性，對人畜機體無害，并且廣泛存在于自然界中，資源豐富、制備成本低廉，安全環保。近年來，新型噬菌體抑菌劑研發已受到廣泛關注，世界各國在噬菌體資源、生物學特性以及在各種基質中的控菌方面開展了大量研究，在美國和歐洲國家已經形成沙門氏菌、李斯特菌等病原菌的商品化生物抑菌劑，在控制食品及生產環境中的病原菌污染與傳播中具有高效、廉價、安全等優勢。盡管霍氏腸桿菌是動物養殖和食品生產中重要的有害生物因子，由于國內外對其生物學特性研究較少，迄今為止霍氏腸桿菌的噬菌體抑菌劑及其應用尚無報道。

發明內容

發明目的：針對現有技術存在的問題，本發明提供一種對霍氏腸桿菌具有強烈裂解作用的噬菌體，該噬菌體可以用于控制食品及生產環境中霍氏腸桿菌污染。

本發明還提供所述噬菌體在制備霍氏腸桿菌及其生物膜抑制劑中的應用。

技術方案：為了實現上述目的，本發明所述的一種霍氏腸桿菌(Enterobacterhormaechei)噬菌體YZU.P.A-5，經鑒定具有獨特的基因組結構特征，屬于一種新型噬菌體，本發明的噬菌體是從江蘇省揚州市農貿市場污水樣品中分離獲得，具有高效裂解霍氏腸桿菌功能的霍氏腸桿菌噬菌體YZU.P.A-5(Enterobacter hormaechei phage YZU.P.A-5)，保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC)，保藏地址：武漢武漢大學；保藏編號：CCTCCNO：M 2020206；保藏日期：2020年6月15日。

本發明中霍氏腸桿菌噬菌體YZU.P.A-5具有以下生物學特征：

(1)形態學特征：通過透射電鏡觀察，YZU.P.A-5頭部對稱，直徑約為77.5nm，尾部長72.2nm，具有伸縮性尾鞘，形態學特征歸屬肌尾噬菌體科。

(2)核酸類型：YZU.P.A-5為dsDNA噬菌體。