[發明專利]多重檢測呼吸道病毒核酸的方法及試劑盒

有效

• 申請號: 202010980496.9
• 申請日: 2020-09-17
• 公開（公告）號: CN112063756B
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發明（設計）人: 蔣析文;黃桃生;李欣鈺;黃志文;林衛萍
• 申請（專利權）人: 廣州達安基因股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 上海助之鑫知識產權代理有限公司 31328
• 代理人: 陳詳

1.一種多重檢測呼吸道病毒核酸的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括引物對集和探針集；

其中，所述引物對集由第一引物對組、第二引物對組、第三引物對組、第四引物對組、和第五引物對組組成，其中：

所述第一引物對組包括如SEQ ID NO.5所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.6所示的反向引物；

所述第二引物對組包括如SEQ ID NO.7所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.8所示的反向引物；

所述第三引物對組包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.2所示的反向引物；

所述第四引物對組包括如SEQ ID NO.3所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.4所示的反向引物；

所述第五引物對組包括如SEQ ID NO.9所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.10所示的反向引物；

所述探針集由檢測探針SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、和SEQ ID NO.15組成。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括第一容器，所述第一容器內包含引物探針混合液，所述引物探針混合液中包含多種引物和多種探針，其中所述引物為多核苷酸序列分別如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ IDNO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示的引物；所述探針為分別具有SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、和SEQ ID NO：14、SEQID NO.15所示的多核苷酸序列的探針。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括第二容器，所述第二容器內包含熱啟動Taq酶、逆轉錄酶、和dNTPS。

4.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括第三容器，所述第三容器內包含陽性對照。

5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括第四容器，所述第四容器內包含陰性對照。

6.一種非診斷目的的檢測呼吸道病毒核酸的方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(1)提供待檢測對象的核酸樣本；

(2)制備PCR反應體系并進行熒光定量PCR檢測：

其中，所述PCR反應體系包括：步驟(1)提供的所述核酸樣本和引物探針混合液，所述引物探針混合液中包含多種引物和多種探針，其中所述引物為多核苷酸序列分別如SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、和SEQ ID NO：10所示的引物；所述探針為分別具有SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、和SEQ ID NO：15所示的多核苷酸序列的探針。

7.引物對集、和探針集的用途，用于制備PCR檢測試劑盒，所述PCR檢測試劑盒用于檢測呼吸道病毒核酸；

其中，所述引物對集由第一引物對組、第二引物對組、第三引物對組、第四引物對組、和第五引物對組組成，其中：

所述第一引物對組包括如SEQ ID NO.5所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.6所示的反向引物；

所述第二引物對組包括如SEQ ID NO.7所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.8所示的反向引物；

所述第三引物對組包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.2所示的反向引物；

所述第四引物對組包括如SEQ ID NO.3所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.4所示的反向引物；

所述第五引物對組包括如SEQ ID NO.9所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.10所示的反向引物；

所述探針集由檢測探針SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、和SEQ ID NO.15組成。