[發明專利]一種加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法及其應用在審
| 申請號： | 202010980322.2 | 申請日： | 2020-09-17 |
| 公開（公告）號： | CN112029724A | 公開（公告）日： | 2020-12-04 |
| 發明（設計）人： | 王剛;葉永清;鄭清富 | 申請（專利權）人： | 和泓尚醫(成都)生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0784 | 分類號： | C12N5/0784;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 濟南鼎信專利商標代理事務所(普通合伙) 37245 | 代理人： | 李雙 |
| 地址： | 610000 四川省成都市*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 加速 樹突 細胞 成熟 體外 培養 方法 及其 應用 | ||
1.一種加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：包括步驟：
(1)將PBMC細胞用1640培養液重懸于培養容器中，然后將該培養容器至于恒溫、并提供氣體碳源的培養箱中培養；
(2)培養至預定時間后晃動培養容器，棄去懸浮細胞，然后加入DC無血清培養基、GM-CSF試劑、Il-4試劑、cholesterol試劑，繼續在所述培養箱中培養；
(3)培養至第三天時加入LPS，IL-1alpha，繼續培養至得到成熟DC細胞，即得。
2.根據權利要求1所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：步驟(1)中，所述培養箱的溫度保持37℃恒溫，并以體積濃度為5％的二氧化碳為碳源。
3.根據權利要求1所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：步驟(2)中，所述預定時間為1～2h。
4.根據權利要求1所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：步驟(2)中，所述GM-CSF試劑在培養容器中的濃度為300-800U/ml，所述Il-4試劑在培養容器中的濃度為10-30ng/ml，所述cholesterol試劑在培養容器中的濃度為0.2-0.5ul/ml。
5.根據權利要求1-4任一項所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：步驟(3)中，所述LPS在培養容器中的濃度為10-30ug/ml。
6.根據權利要求5所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：步驟(3)中，所述IL-1alpha在培養容器中的濃度為20-50ng/ml。
7.根據權利要求1-4任一項所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法，其特征在于：步驟(3)中，至少繼續培養至第四天時采集成熟DC細胞。
8.權利要求1-7任一項所述的加速樹突狀細胞成熟的體外培養方法在用于腫瘤治療的藥物制備中的應用。
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