[發(fā)明專利]免疫調(diào)節(jié)用的泥丁肽及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010972082.1
• 申請(qǐng)日: 2020-09-16
• 公開（公告）號(hào): CN112126669B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何建林;洪碧紅;譚然;白鍇凱;牛四文;唐超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 自然資源部第三海洋研究所
• 主分類號(hào): C12P21/06
• 分類號(hào): C12P21/06
• 代理公司: 廣東金泰智匯專利商標(biāo)代理事務(wù)所(普通合伙) 44721
• 代理人: 原明云

本發(fā)明公開泥丁肽及其制備方法，具體的其中20?25％的泥丁肽分子量大于1000，75?80％的泥丁肽分子量小于1000。本發(fā)明提供的泥丁肽對(duì)KM鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性的影響，可以顯著的促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞的增殖，同時(shí)，泥丁肽增加了小鼠巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力，因此本發(fā)明所述的泥丁肽具有免疫調(diào)節(jié)功能。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及具有免疫調(diào)節(jié)能力的泥丁肽。

背景技術(shù)

可口革囊星蟲，學(xué)名：Phascolosoma esculenta，俗稱泥丁，隸屬于星蟲動(dòng)物門，為我國土著種，廣泛分布于長江口以南的沿海地區(qū)，產(chǎn)量豐富。可口革囊星蟲是高蛋白低脂肪的海洋生物。我國多種草本中記載了其食用和藥用價(jià)值，是我國民間傳統(tǒng)藥食滋補(bǔ)佳品，有些地區(qū)用其代替中藥冬蟲夏草。現(xiàn)有技術(shù)對(duì)可口革囊星蟲多糖進(jìn)行了大量研究，如公告號(hào)CN103483462B公開了可口革囊星蟲多糖具有抗敗血癥的作用，但是對(duì)其蛋白質(zhì)的研究甚少。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明提供了泥丁肽及其制備方法，具體的其中20-25%的泥丁肽分子量大于1000，75-80%的泥丁肽分子量小于1000。本發(fā)明提供的泥丁肽對(duì)KM鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性的影響，可以顯著的促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞的增殖，同時(shí)，泥丁肽增加了小鼠巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力，因此本發(fā)明所述的泥丁肽具有免疫調(diào)節(jié)功能。

具體，一方面，本發(fā)明提供了一種泥丁肽，其中20-25%的泥丁肽分子量大于1000，75-80%的泥丁肽分子量小于1000。

在一些實(shí)施例中，蛋白質(zhì)含量70-72%，灰分3-4%，水分10-12%，總糖5-6%。

在一些實(shí)施例中，酸溶性蛋白質(zhì)68-72%，和/或游離氨基酸6-8%，和/或低聚肽61-63%。

在一些實(shí)施例中，所述游離氨基酸包括精氨酸（Arg）、賴氨酸（Lys）、丙氨酸（Ala）、蘇氨酸（Thr）、甘氨酸（Gly）、纈氨酸（Val）、絲氨酸/脯氨酸（Ser/Pro）、異亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、甲硫氨酸（Met）、組氨酸（His）、苯丙氨酸（Phe）、谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）、酪氨酸（Tyr）。

另一方面，本發(fā)明提供了一種制備本發(fā)明所述泥丁肽的制備方法，采用以下方法制備得到：

a)前處理：將水加入泥丁體壁肉，攪拌，調(diào)節(jié)溫度及pH值；

b)酶解：加入蛋白酶酶解，酶解是一次或多次，每次酶解時(shí)間5-7小時(shí)；

c)：后處理：離心，上清液凍干既得。

在一些實(shí)施例中，所述蛋白酶包括：胰蛋白酶、動(dòng)物蛋白水解酶、木瓜蛋白酶、風(fēng)味酶、中性蛋白酶、菠蘿蛋白酶、堿性蛋白酶和胃蛋白酶中的一種或多種。

在一些實(shí)施例中，所述酶解是二次或三次，；每次酶解完，滅酶后再進(jìn)行下一次酶解。

在一些實(shí)施例中，本發(fā)明泥丁肽采用以下方法制備得到：

（1）前處理：泥丁體壁肉，加入水，攪拌，加熱至45-55 °C，調(diào)pH至7-8；

（2）第一酶解：加入動(dòng)物蛋白水解酶，攪拌5-7 h，滅酶；

（3）第二酶解：調(diào)節(jié)溫度至45-55 °C，調(diào)pH至6-7，加入胰蛋白酶，攪拌5-7 h，滅酶；

（4）后處理：離心，上清液凍干既得。

在一些實(shí)施例中，動(dòng)物蛋白水解酶用量為泥丁體壁肉的1-3%；胰蛋白酶用量是泥丁體壁肉的1-3%。

在一些實(shí)施例中，調(diào)pH的調(diào)節(jié)劑是酸調(diào)節(jié)劑或堿調(diào)節(jié)劑。