[發明專利]CEP55蛋白在調控纖毛去組裝和制備纖毛相關疾病模型中的應用

有效

• 申請號: 202010971546.7
• 申請日: 2020-09-16
• 公開（公告）號: CN112062827B
• 公開（公告）日: 2022-10-21
• 發明（設計）人: 李慧艷;張宇程;李愛玲;周濤;吳敏;涂海情
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027;C12Q1/02;A61K49/00;C12Q1/6883;G01N33/68;A61K48/00;A61K38/17;A61P25/00;A61P13/12;A61P43/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張立娜

1.能夠抑制CEP55蛋白表達的物質在如下任一中的應用：

（B1）制備用于抑制動物細胞或動物體中纖毛去組裝的產品；

（B2）制備用于促進動物細胞或動物體中纖毛發生的產品；

（B3）制備纖毛過度生長相關疾病動物模型；

所述動物細胞為哺乳動物細胞；所述動物為哺乳動物；

所述哺乳動物細胞為腎小管上皮細胞或胚胎成纖維細胞或人視網膜色素上皮細胞；所述哺乳動物為人或小鼠；

能夠抑制所述CEP55蛋白表達的物質為能夠實現對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行抑制表達或敲除的物質；

能夠實現對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行抑制表達的物質為能夠抑制編碼所述CEP55蛋白的核酸分子表達的siRNA；

能夠實現對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行敲除的物質包括：

（1）采用CRISPR/Cas9技術對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行敲除時所用的sgRNA或能夠轉錄得到所述sgRNA的DNA分子或含有所述DNA分子的表達盒或表達載體；

（2）Cas9蛋白或用于表達Cas9蛋白的表達載體。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：能夠實現對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行敲除的物質還包括：

（3）用于同源重組的donor載體組成。

3.能夠促進CEP55蛋白表達的物質在如下任一中的應用：

（C1）制備用于促進動物細胞或動物體中纖毛去組裝的產品；

（C2）制備用于抑制動物細胞或動物體中纖毛發生的產品；

所述動物細胞為哺乳動物細胞；所述動物為哺乳動物；

所述哺乳動物細胞為腎小管上皮細胞或胚胎成纖維細胞或人視網膜色素上皮細胞；所述哺乳動物為人或小鼠；

能夠促進所述CEP55蛋白表達的物質為能夠表達所述CEP55蛋白的核酸分子或含有所述核酸分子的表達盒、重組載體、重組菌或轉基因細胞系。

4.根據權利要求1-3中任一所述的應用，其特征在于：所述纖毛為初級纖毛。

5.根據權利要求1-3中任一所述的應用，其特征在于：所述CEP55蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

6.一種抑制動物細胞或動物體中纖毛去組裝的方法，包括如下步驟：降低動物細胞內或動物體內CEP55蛋白的表達量；

所述動物細胞為哺乳動物細胞；所述動物為哺乳動物；

所述哺乳動物細胞為腎小管上皮細胞或胚胎成纖維細胞或人視網膜色素上皮細胞；所述哺乳動物為人或小鼠；

所述方法既不是疾病診斷性方法也不是疾病治療性方法。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：降低所述動物細胞內或所述動物體內所述CEP55蛋白的表達量通過對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行抑制表達或敲除實現；

所述動物細胞為哺乳動物細胞；所述動物為哺乳動物；

所述哺乳動物細胞為腎小管上皮細胞或胚胎成纖維細胞或人視網膜色素上皮細胞；所述哺乳動物為人或小鼠。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行抑制表達通過向所述動物細胞或所述動物導入能夠抑制編碼所述CEP55蛋白的核酸分子表達的siRNA實現。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示。

10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：對所述動物細胞內或所述動物體內編碼所述CEP55蛋白的核酸分子進行敲除通過CRISPR/Cas9技術實現。