[發明專利]從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法

在審

• 申請號: 202010966193.1
• 申請日: 2020-09-15
• 公開（公告）號: CN112552418A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 夏崢
• 申請（專利權）人: 淄博職業學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 淄博市眾朗知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 37316
• 代理人: 呂明哲

1.一種從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：由以下步驟組成：

(1)將紅曲霉發酵液抽濾除去菌絲體和不溶物，得到的濾液減壓濃縮為原體積的20％-30％，加入等體積的乙酸乙酯萃取，然后除去乙酸乙酯層；

(2)向得到的水層中加入粉末狀活性炭，室溫下磁力攪拌，然后抽濾除去活性炭粉末；

(3)濾液經減壓濃縮至原體積的5％-10％，然后將其透析，將透析完的保留液減壓濃縮至原體積的5％-10％，重復透析2-3次；

(4)將濃縮液倒入乙醇溶液中，邊傾倒邊攪拌使其混合均勻，于1-5℃環境下放置20-24h，使其充分沉淀；

(5)離心得沉淀部分，采用無水乙醇和丙酮分別洗滌沉淀2-3次，將最終獲得的沉淀烘干，得多糖粗品；

(6)將多糖粗品配制成濃度為5-6％的溶液，加入Sevag溶液，漩渦震蕩，然后離心，吸取上層多糖溶液重復操作至界面無白色胨狀物出現為止；

(7)將上層多糖溶液離心除去不溶物，減壓濃縮后冷凍干燥，即得到粗多糖。

2.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(1)中所述的紅曲霉發酵液的發酵條件為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基，配方組成為馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂15-20克以及蒸餾水1000毫升；28℃搖床培養15天。

3.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(1)中所述的采用2-3層濾紙抽濾除去菌絲體和不溶物；所述加入等體積的乙酸乙酯萃取1.0-2h，除去乙酸乙酯層，重復操作3-5次。

4.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(2)中所述的粉末狀活性炭的加入量為體積分數1.0％-1.5％，磁力攪拌24-26h，然后采用2-3層濾紙抽濾以除去活性炭粉末。

5.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(3)中所述的于MwCO3500的透析袋中透析12-18h。

6.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(4)中所述的乙醇的濃度為95％，乙醇的體積是倒入的濃縮液體積的10-12倍。

7.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(5)中所述的離心轉速為3000-4000r/min，離心時間10-15min；所述的洗滌沉淀2-3次，并于50-55℃烘干12-24h。

8.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(6)中所述的Sevag溶液為氯仿:正丁醇＝4:1的體積比混合液，Sevag溶液加入的體積為多糖溶液體積的15％-25％。

9.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(6)中所述的漩渦震蕩10-15min，然后于7000-8000r/min轉速下離心8-12min。

10.根據權利要求1所述的從紅曲霉發酵液中提取分離粗多糖的方法，其特征在于：步驟(7)中所述的離心轉速為3000-4000r/min，離心時間10-15min，冷凍干燥溫度為-10℃至-50℃，干燥室真空度＜0.11MPa，干燥時間24-28h。