[發明專利]一種用于糞便中雙歧桿菌屬檢測的試劑及其應用在審
| 申請號： | 202010962199.1 | 申請日： | 2020-09-14 |
| 公開（公告）號： | CN111996270A | 公開（公告）日： | 2020-11-27 |
| 發明（設計）人： | 魏宏泉;肖宏;孫相鑫;藍麗;姜駿飛 | 申請（專利權）人： | 壹宏（深圳）基因有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281 | 代理人： | 李小焦;郭燕 |
| 地址： | 518000 廣東省深圳市龍崗區葵涌街道*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 糞便 中雙歧 桿菌 檢測 試劑 及其 應用 | ||
1.一種用于糞便中雙歧桿菌屬檢測的試劑，其特征在于：包括Seq ID No.1所示序列的上游引物和Seq ID No.2所示序列的下游引物，
Seq ID No.1：5’-ATACCCTGGTAGTCCACGC-3’
Seq ID No.2：5’-ACATCCAGCATCCACCGT-3’。
2.根據權利要求1所述的用于糞便中雙歧桿菌屬檢測的試劑，其特征在于：還包括用于染料法實時熒光定量PCR擴增的試劑。
3.根據權利要求2所述的用于糞便中雙歧桿菌屬檢測的試劑，其特征在于：所述用于染料法實時熒光定量PCR擴增的試劑包括TB Green Premix Ex Taq反應液和ROX參比染料。
4.根據權利要求1-3任一項所述的用于糞便中雙歧桿菌屬檢測的試劑在非診斷治療目的的糞便微生物檢測中的應用。
5.一種非診斷治療目的的糞便雙歧桿菌屬的檢測方法，其特征在于：包括采用權利要求1-3任一項所述的用于糞便中雙歧桿菌屬檢測的試劑，對獲取自糞便樣品的核酸樣本進行染料法實時熒光定量PCR擴增，根據擴增結果判斷糞便樣品中是否含有糞便雙歧桿菌屬。
6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于：還包括對染料法實時熒光定量PCR擴增結果進行融解曲線分析，融解曲線出峰單一則判斷檢測結果特異性強，出峰不單一則判斷檢測結果存在非特異性擴增或引物二聚體。
7.根據權利要求5或6所述的檢測方法，其特征在于：還包括對染料法實時熒光定量PCR擴增產物進行測序，根據測序結果判斷是否為糞便雙歧桿菌屬。
8.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于：所述對染料法實時熒光定量PCR擴增產物進行測序，具體包括將染料法實時熒光定量PCR擴增產物與載體連接，然后對重組載體進行測序。
9.根據權利要求8所述的檢測方法，其特征在于：所述載體為T載體。
10.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于：所述根據測序結果判斷是否為糞便雙歧桿菌屬，具體包括將測序結果用NCBI進行BLAST比對，根據比對結果判斷是否為糞便雙歧桿菌屬。
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