[發(fā)明專利]一種急性熱應(yīng)激動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010960778.2
• 申請日: 2020-09-14
• 公開（公告）號: CN112219787B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李偉豪;劉逸雷
• 申請（專利權(quán)）人: 佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 劉俊文

1.一種急性熱應(yīng)激動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：將動(dòng)物在41℃的溫度下飼養(yǎng)12h作為造模期，然后在18~20℃的溫度下飼養(yǎng)5~7d；

在造模期之前，將動(dòng)物預(yù)先喂養(yǎng)12h，自由飲水和進(jìn)食；

所述動(dòng)物為雞，其體重為2~3kg；

所述構(gòu)建方法制得的急性熱應(yīng)激動(dòng)物模型，屬于免疫能力低的易感動(dòng)物模型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述急性熱應(yīng)激動(dòng)物模型在評價(jià)抗熱應(yīng)激藥物效果領(lǐng)域中的應(yīng)用，包括以下步驟：將模型動(dòng)物分成兩組，分別喂食正常飼料和添加有抗熱應(yīng)激藥物的飼料，飼養(yǎng)4~5d，然后將模型動(dòng)物處死，收集脾臟和肝臟，測定脾臟和肝臟的器官指數(shù)，并測定脾臟中HSP70，IFN-α，IFN-β和IL-1β的蛋白表達(dá)量。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述測定脾臟中的HSP70，IFN-α，IFN-β和IL-1β的蛋白表達(dá)量的具體過程為：提取脾臟的蛋白質(zhì)，變性后進(jìn)行電泳，然后將蛋白條帶印跡到轉(zhuǎn)印膜上，將其浸入至封閉溶液中；以β-肌動(dòng)蛋白作為內(nèi)部對照，針對HSP70，IFN-α，IFN-β和IL-1β的一抗進(jìn)行免疫印跡，然后用緩沖溶液洗滌后與HRP標(biāo)記兔抗小鼠IgG抗體一起溫育1h，然后使用發(fā)光試劑盒進(jìn)行顯色，最后采用ImageJ軟件得出HSP70，IFN-α，IFN-β和IL-1β的蛋白質(zhì)表達(dá)量。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所述轉(zhuǎn)印膜為聚偏二氟乙烯膜。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的構(gòu)建方法，其特征在于，所使用的電泳凝膠為10%或15%的SDS-PAGE。