[發明專利]一種新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202010957773.4
• 申請日: 2020-09-11
• 公開（公告）號: CN112098645A
• 公開（公告）日: 2020-12-18
• 發明（設計）人: 劉萍;欒大偉;張振斌;史光輝;何景珍;田鴿
• 申請（專利權）人: 博奧賽斯（重慶）生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 天津企興智財知識產權代理有限公司 12226
• 代理人: 馬倩倩

本發明提供了一種新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒，包括磁性顆粒?抗FITC抗體、FITC標記新型冠狀病毒重組抗原、以及堿性磷酸酶或辣根過氧化酶標記人IgA單克隆抗體。本發明試劑盒可以很好的補充核酸陰性新冠感染患者的診斷，同時對于無癥狀感染患者的診斷也表現出較好的價值，可實現早診斷、早治療，盡可能縮小窗口期，對疑似病例的早期診斷具有重要的研究價值。

技術領域

本發明屬于免疫分析檢測技術領域，尤其是涉及一種新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒。

背景技術

首次感染和反復接觸病毒時病毒載量高，病原體的特定蛋白如Covid-19的S蛋白和N蛋白等會刺激免疫系統引起抗體應答。

T.M.Gallagher研究發現冠狀病毒刺突蛋白(S蛋白)是一種I型跨膜包膜糖蛋白，由負責與病毒結合和融合的S1和S2兩個結構域組合而成，S1中間片段是一個受體結合域，可以與靶細胞上的血管緊張素轉化酶(ACE2)特異性結合，從病毒表面突出，可以更早地與宿主細胞接觸，是中和抗體的主要誘導劑；S2結構域包含一個融合肽和兩個七肽重復序列，負責病毒與靶細胞膜之間的融合。病毒S蛋白上的RBD與靶細胞上的ACE2結合后，S2通過HR1和HR2區之間的相互作用而發生構象改變，形成融合核心，并使病毒和靶細胞膜緊密接近，從而導致病毒融合進入細胞。

全長的S蛋白包含RBD和其他病毒功能域以及多個抗原中和表位，因此與單獨的RBD相比，可誘導出更有效的中和抗體。而RBD實際引起中和抗體效價比全長S蛋白高得多的可能原因之一是后者含有非中和表位，可誘導增強抗體。

人體在被病毒感染后，最早出現的抗體是IgM及IgA抗體，IgA反應出現并早期生長，在第3周達到高峰，與IgM相比，IgA的抗體具有獨特的抗體的動力學特征，并且比IgM反應更強，更持久。

IgM，IgA和IgG型病毒特異性抗體水平是預測人群對該疾病的免疫力以及是否與其他冠狀病毒發生交叉反應的重要指標。Chintalacharuvu K.R在文章中指出IgA在人類機體中是一類比較獨特的抗體，一方面由于其分子形式的異質性，具有兩個IgA亞類，分別稱為IgA1和IgA2。像所有Ig一樣，每個子類都包含兩個相同的重鏈(HC)和兩個相同的輕鏈(LC)的基本分子單元。每條鏈在其N末端以可變區開始，然后是恒定區。每個子類中的LC都相同，但是HC在其恒定區域內有所不同，它們由不同的Cα基因編碼。另外一方面IgA抗體特異性的不會參與機體的免疫應答，是介導機體粘膜免疫的主要因子，其在粘膜分泌物中能有效地阻止外界抗原附著或侵入人粘膜上皮，從而避免外來物給機體造成的損傷。

Ig A在正常人血清中的含量僅次于IgG，按其免疫功能又分為血清型和分泌型蛋白，血清型IgA占總量的85％左右，大部分血清型IgA為單體，大約10％-15％為二聚體，也發現有少量多聚體IgA的功能區的分布于與IgG相似。分泌型IgA為二聚體，其α重鏈之間存在相對較短的鉸鏈，僅有10多個氨基酸殘基組成。Patrícia de Sousa-Pereira和JennyM.Woof研究發現IgA鉸鏈序列具有彼此獨立彎曲的能力，但也可能增加對蛋白水解的敏感性，鉸鏈為整個IgA的分子提供了對于活性至關重要的靈活性。鑒于分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液、胃腸液、尿液、汗液等。IgA檢測可以同時檢測早期和記憶IgA應答，是當前各種抗體檢測有效的補充。檢測感染后迅速產生的抗體，可成為與PCR結合使用以提高檢測靈敏度和準確性的工具。

總體上說，IgM、IgA、IgG三種抗體分型的檢測可有效用于疾病病程發展的評估。基于以上抗體的血清學分析通過對SARS-CoV-2的免疫反應及血清轉化的研究，從而確定COVID-19病程，對于流行病學研究、監測研究、疫苗試驗必不可少。

當前國內外免疫層面關于新型冠狀病毒診斷產品主要是總抗以及IgM、IgG抗體聯合檢測試劑，而新型冠狀病毒特異性IgA抗體檢測還未普及。因此，有必要提供一種IgA的檢測方法，實現對疑似病例的早期診斷。