[發明專利]一種新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202010957773.4
• 申請日: 2020-09-11
• 公開（公告）號: CN112098645A
• 公開（公告）日: 2020-12-18
• 發明（設計）人: 劉萍;欒大偉;張振斌;史光輝;何景珍;田鴿
• 申請（專利權）人: 博奧賽斯（重慶）生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 天津企興智財知識產權代理有限公司 12226
• 代理人: 馬倩倩

1.一種新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒，其特征在于：包括磁性顆粒-抗FITC抗體、FITC標記新型冠狀病毒重組抗原、堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶標記鼠抗人IgA單克隆抗體、化學發光底物、牛血清白蛋白緩沖液。

2.根據權利要求1所述的新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒，其特征在于：FITC標記新型冠狀病毒抗原中的新型冠狀病毒抗原為S-RBD蛋白。

3.根據權利要求1所述的新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒，其特征在于：所述磁性顆粒-抗FITC抗體的制備，包括以下步驟，將四氧化三鐵微球用戊二醛進行活化，室溫混勻4-6h后，用0.02-0.05M PBS PH＝7.4的緩沖液清洗三次，并用該溶液進行懸浮，濃度為50-80mg/mL，之后，每毫升懸浮液中，加入鼠抗FITC抗體約100-180ug，于37℃混勻溫育4-10h，用等體積的0.02-0.05M PBS、質量分數5％BSA pH＝7.4緩沖液于37℃封閉1小時；最后，用質量分數0.5％BSA、0.02-0.05M Tris-HCl pH＝8.0的緩沖液清洗三次；所四氧化三鐵的微球的粒徑為0.1-0.5μm。

4.根據權利要求1所述的新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒，其特征在于：還包括牛血清白蛋白緩沖液，其制備包括如下步驟，將2.1-2.6g BSA溶于2.1-2.8L0.15-0.20M的PBS緩沖液中，pH值范圍在7.4±0.2，攪拌至完全溶解，并加入2.1-2.5mLProClin^TM300攪拌混勻30-60min。

5.根據權利要求1所述的新型冠狀病毒IgA抗體磁微粒化學發光法檢測試劑盒，其特征在于：FITC標記新型冠狀病毒重組抗原的制備，包括如下步驟：

1)將待標記重組抗原置于透析袋中，透析緩沖液為0.02-0.05M碳酸鹽緩沖液，透析1-2h；

2)將FITC溶于二甲基亞砜中，配制濃度為1-2mg/ml；

3)將透析完成的重組抗原與FITC按照質量比為1:(0.5-1)的比例進行混合，輕搖混勻，2-8℃避光反應8-12h；

4)向上述反應混合液中加入1-5M的NH₄CL，并使終濃度達到30-60mM，置于2-8℃反應2-4h，以終止反應；

5)將上述完成的標記液置于0.01-0.05M的PBS緩沖液中透析12h后，取出標記好的原料，加入等體積的甘油保存備用。