[發明專利]一種聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的引物和探針、試劑盒及應用在審
| 申請號： | 202010955621.0 | 申請日： | 2020-09-11 |
| 公開（公告）號： | CN112011646A | 公開（公告）日： | 2020-12-01 |
| 發明（設計）人： | 馮小宇;王英超;高曉龍;程汝佳;梅力;陳會玲;張啟龍;吳迪;程敏姮 | 申請（專利權）人： | 北京市動物疫病預防控制中心 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 102629 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 聯合 檢測 非洲 豬瘟 病毒 狂犬病 野毒株 引物 探針 試劑盒 應用 | ||
1.一種聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的引物和探針，其特征在于，包括：
檢測非洲豬瘟病毒的正向引物，其序列如SEQ ID NO:1所示；檢測非洲豬瘟病毒的反向引物，其序列如SEQ ID NO:2所示；檢測非洲豬瘟病毒的TaqMan探針，其序列如SEQ ID NO:3所示；
檢測豬偽狂犬病病毒野毒株的正向引物，其序列如SEQ ID NO:4所示，檢測豬偽狂犬病病毒野毒株的反向引物，其序列如SEQ ID NO:5所示，檢測檢測豬偽狂犬病病毒野毒株的TaqMan探針，其序列如SEQ ID NO:6所示。
2.根據權利要求1所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的引物和探針，其特征在于：
所述的用于檢測非洲豬瘟病毒的TaqMan探針，其5’端標記的熒光報告基團為FAM，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ1；
所述的用于檢測豬偽狂犬病病毒野毒株的TaqMan探針，其5’端標記的熒光報告基團為VIC，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ1。
3.一種聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的雙重實時熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于：
包括引物、探針混合液，所述引物、探針混合液包含如權利要求1或2所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的引物和探針。
4.根據權利要求3所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的雙重實時熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于：
還包含qPCR預混液、陽性對照品、陰性對照品。
5.根據權利要求4所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的雙重實時熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于：
所述陽性對照品為非洲豬瘟病毒B646L基因質粒標準物質與豬偽狂犬病病毒標準毒株的混合液，所述陰性對照品為無核酸酶水。
6.根據權利要求4所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的雙重實時熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于：
所述qPCR預混液為Premix Ex Taq Probe qPCR 2X。
7.根據權利要求3所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的雙重實時熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征在于：
所述引物、探針混合液中用于檢測非洲豬瘟病毒的正向引物、反向引物、TaqMan探針的濃度均為0.1μmol/L；
所述引物、探針混合液中用于檢測豬偽狂犬病病毒野毒株的正向引物、反向引物、TaqMan探針的濃度均為0.4μmol/L。
8.如權利要求1或2所述的聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的引物和探針在制備聯合檢測非洲豬瘟病毒和豬偽狂犬病病毒野毒株的試劑盒中的應用。
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