[發(fā)明專利]一種新型冠狀病毒IgA抗體膠體金檢測(cè)試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010955272.2
• 申請(qǐng)日: 2020-09-11
• 公開（公告）號(hào): CN112114140A
• 公開（公告）日: 2020-12-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉朝陽;欒大偉;劉萍;李雅慧;張?zhí)煲?/a>
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 博奧賽斯（天津）生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/532
• 代理公司: 天津企興智財(cái)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12226
• 代理人: 馬倩倩

本發(fā)明提供了一種新型冠狀病毒IgA抗體膠體金檢測(cè)試劑盒，包括設(shè)有包被板以及樣品墊的檢測(cè)卡，包被板的金標(biāo)區(qū)包被有膠體金標(biāo)記抗人IgA，檢測(cè)區(qū)包被有新型冠狀病毒重組抗原，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠IgG。本發(fā)明試劑盒可以快速檢測(cè)新型冠狀病毒IgA抗體。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于免疫分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種新型冠狀病毒IgA抗體膠體金檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)

冠狀病毒屬于單股正鏈RNA病毒，既往已知感染人的冠狀病毒有6種，即HCoV-229E、HCoV-OC43、SARSr-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1和MERSr-CoV。新型冠狀病毒(2019-nCoV)屬于第7種。

新型冠狀病毒肺炎是一種急性感染性肺炎，其病原體是一種先前未在人類中發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒，即2019新型冠狀病毒。經(jīng)呼吸道飛沫和密切接觸傳播是主要的傳播途徑，在相對(duì)封閉的環(huán)境中長時(shí)間暴露于高濃度氣溶膠情況中存在經(jīng)氣溶膠傳播的可能?；颊叱跏及Y狀多為發(fā)熱，乏力和干咳，并逐漸出現(xiàn)呼吸困難等嚴(yán)重表現(xiàn)。多數(shù)患者預(yù)后良好，部分嚴(yán)重病例可出現(xiàn)急性呼吸窘迫綜合征或膿毒癥休克，甚至死亡。

目前已知新型冠狀病毒SARS-COV-2為一種粘膜靶向的病毒，其可以刺激產(chǎn)生大量分泌型IgA，進(jìn)而激活粘膜免疫應(yīng)答。但目前仍無SARS-COV-2特異性IgA抗體檢測(cè)試劑盒，提出一種快速檢測(cè)新型冠狀病毒IgA抗體的方法。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明旨在提出一種新型冠狀病毒IgA抗體膠體金檢測(cè)試劑盒，可以快速檢測(cè)新型冠狀病毒IgA抗體。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種新型冠狀病毒IgA抗體膠體金檢測(cè)試劑盒，設(shè)有包被板以及樣品墊的檢測(cè)卡，包被板的金標(biāo)區(qū)包被有膠體金標(biāo)記抗人IgA，檢測(cè)區(qū)包被有新型冠狀病毒重組抗原，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠IgG。

優(yōu)選的，新型冠狀病毒重組抗原為S-RBD蛋白。

優(yōu)選的，所述樣品墊上涂有樣本處理液，所述樣本處理液為含BSA的質(zhì)量濃度為0.5-1.5％、酪蛋白的質(zhì)量濃度為0.5-1％，蔗糖的質(zhì)量濃度為0.3-1.2％、海藻糖的質(zhì)量濃度為0.1-1.2％、Procline的體積濃度為0.05-0.3％、tween-20體積濃度為0.05-0.5％的pH為7.0-7.6的tris緩沖液；且樣品墊的制備方法如下，將樣品墊處理液以45-85微升每平方厘米的量，噴涂或浸泡玻纖膜或聚酯膜，37-45℃條件下，烘干8-16小時(shí)。

優(yōu)選的，膠體金標(biāo)記抗人IgA的制備包括如下步驟，向均一的膠體金溶液中添加K₂CO₃，調(diào)節(jié)pH至6.0-7.5，向調(diào)好pH的溶液中添加抗人IgA，使其蛋白含量為15-60μg/mL，偶聯(lián)0.5-4小時(shí)，向其中添加終止液，終止偶聯(lián)反應(yīng)，終止液的終濃度(質(zhì)量體積比)為1-1.5％；終止反應(yīng)后的0.5-2小時(shí)后離心處理，離心參數(shù)為12000-18000RPM，離心處理15-30min，棄上清，沉淀用復(fù)溶液復(fù)溶，2-8℃保存?zhèn)溆谩?/p>

優(yōu)選的，終止液為牛血清蛋白、脫脂乳粉或甘氨酸中的一種或兩種所配制的水溶液，當(dāng)終止液為其中的一種時(shí)，需配制成為質(zhì)量體積比為5％-10％的溶液，當(dāng)為其中的兩種時(shí)，牛血清蛋白與脫脂乳粉或甘氨酸的質(zhì)量體積比為1：1-4：1，固體質(zhì)量含量和液體體積比為10％；所述復(fù)溶液為0.01-0.05M Tris或PB緩沖液，pH為7.4-8.2，向其中加入NaCl質(zhì)量體積比為0.5-1％,海藻糖質(zhì)量體積比為0.2-1％，PEG20000的質(zhì)量體積比為0.1％-3％；牛血清蛋白質(zhì)量體積比為0.5-3％，Triton X-405體積濃度0.5-1％。