[發(fā)明專利]一種靶向EGFR的熒光分子探針及其制備方法和應用

有效

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• 申請日: 2020-09-10
• 公開（公告）號: CN112028886B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發(fā)明（設計）人: 鄧慧;雷倩;李為民
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫(yī)院
• 主分類號: C07D413/12
• 分類號: C07D413/12;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙) 51224
• 代理人: 王偉

本發(fā)明涉及分子探針技術領域，公開了一種靶向EGFR的熒光分子探針及其制備方法和應用，該熒光分子探針包括有熒光標記基團、連接基團和反應基團；反應基團可與EGFR蛋白靶向結合，并可通過所述熒光標記基團進行特異性標記、示蹤、成像；利用分子影像學可對特定細胞和分子的表達過程進行實時觀測，對目標靶點進行追蹤，從而在分子病理水平實現(xiàn)對疾病發(fā)展狀況的評估以及實現(xiàn)肺癌患者中EGFR突變分型的精準檢測。

技術領域

本發(fā)明屬于分子探針技術領域，特別涉及一種靶向EGFR的熒光分子探針及其制備方法和應用。

背景技術

近年來分子靶向藥物應用非常廣泛，是臨床腫瘤治療的重大突破之一。例如，吉非替尼(易瑞沙)和厄洛替尼(特羅凱)是治療非小細胞肺癌的兩種靶向藥物，屬于表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)。精準檢測肺癌EGFR突變分型是分子靶向藥物用于肺癌治療的關鍵。

在臨床上，對非小細胞肺癌患者使用TKI靶向藥物前需先進行EGFR基因突變狀況的檢測。然而，以現(xiàn)有的技術手段很難實現(xiàn)肺癌患者中EGFR突變分型的精準檢測，其面臨的問題主要包括以下幾個方面：

1)首先，肺癌具有非常復雜的異質(zhì)性，包括個體異質(zhì)性、空間異質(zhì)性及時間異質(zhì)性。個體異質(zhì)性是指不同的肺癌患者，其EGFR突變分型存在很大的差異；空間異質(zhì)是指在不同病灶、同一病灶的不同位置其EGFR的突變分型也不一樣；時間異質(zhì)是指在不同時間段的EGFR突變分型又存在一個動態(tài)變化的差異。因此，在活體水平實現(xiàn)對EGFR突變狀態(tài)的實時、動態(tài)及精準的檢測方法可解決肺癌異質(zhì)性的問題。

2)其次，現(xiàn)有的EGFR突變檢測方法均具有一定局限性，例如利用分子病理檢測EGFR突變存在可重復性差、無法克服空間異質(zhì)性的問題；相對而言，分子檢測更加便捷、重復性好，但缺點是不能直接獲得原發(fā)灶的突變情況、肺癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶內(nèi)的異質(zhì)性問題無法解決。

此外，利用CT、磁共振等傳統(tǒng)影像學方法也不能從分子層面反映EGFR分子分型的信息。因而，為進一步突破肺癌精準診斷與治療的瓶頸，迫切需要發(fā)展一種全新的檢測技術從分子水平準確揭示EGFR的突變情況。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術問題，本發(fā)明的首要目的在于提供一種靶向EGFR的熒光分子探針，通過反應基團可與EGFR蛋白靶向結合，并可通過所述熒光標記基團進行特異性標記、示蹤、成像；利用分子影像學可對特定細胞和分子的表達過程進行實時觀測，對目標靶點進行追蹤，從而在分子病理水平實現(xiàn)對疾病發(fā)展狀況的評估以及實現(xiàn)肺癌患者中EGFR突變分型的精準檢測。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種靶向EGFR的熒光分子探針的制備方法和應用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術方案如下：

一種靶向EGFR的熒光分子探針，結構式如下：

上述結構式中，R1為H、F或Cl中的任意一種；

R2為H、F、Cl或炔基中的任意一種；

R3-NH為熒光標記基團；

R4為(CH₂)n，其中，n為2-3。

在本發(fā)明中，該熒光分子探針的結構包括有熒光標記基團、連接基團和反應基團，左側(cè)的R3-NH為熒光標記基團；中間的R4為連接基團，連接基團的長度不固定，可以根據(jù)實際效果進行相應調(diào)節(jié)，優(yōu)選n＝3；右側(cè)的結構為反應基團；其中，反應基團可與EGFR蛋白靶向結合，并可通過所述熒光標記基團進行特異性標記、示蹤、成像。

進一步地，所述熒光標記基團為苯并噁二唑類染料、萘酰亞胺類染料、羅丹明類染料、菁染料中的至少一種。

進一步地，當所述靶向EGFR的熒光分子探針應用于綠色熒光檢測時，結構式如下：