[發明專利]一種抗VEGFR-2單克隆抗體的檢測性抗體、應用及檢測方法

有效

• 申請號: 202010951208.7
• 申請日: 2020-09-11
• 公開（公告）號: CN112094351B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 白義;吳桐;李曉敏
• 申請（專利權）人: 北京東方百泰生物科技股份有限公司;北京精益泰翔技術發展有限公司
• 主分類號: C07K16/42
• 分類號: C07K16/42;C12N15/13;G01N33/577;C12N15/85;C12N5/10
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本發明提供了一種抗VEGFR?2單克隆抗體的檢測性抗體、應用及檢測方法，檢測性抗體包括重鏈可變區和輕鏈可變區，重鏈可變區的氨基酸序列選自SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8；輕鏈可變區的氨基酸序列選自SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12。本發明篩選得到了一種針對抗VEGFR?2單克隆抗體的檢測性抗體，該抗體可以快速、靈敏、準確的檢測體液中抗VEGFR?2單克隆抗體的藥物濃度，為協助抗VEGFR?2的單克隆抗體臨床診斷和臨床試驗的藥理、藥代分析提供了可靠的研究方法。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，特別涉及一種抗VEGFR-2單克隆抗體的檢測性抗體、應用及檢測方法。

背景技術

腫瘤生長依賴新生血管的形成已經在腫瘤生物學上研究的比較透徹。新生血管生成是指從預先存在的毛細血管以出芽方式形成新的血管的過程。這一過程是由多種因子來激發和調控的，包括堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,BFGF)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor,PDGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1)、肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)、轉移生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白細胞介素6(interleukin-6,IL-6)等。其中，VEGF是目前發現的最為強大和專一的刺激內皮細胞增生的因子，此外，它還有增加血管通透性，趨化血管內皮細胞等功能。迄今為止,已發現的VEGF信號轉導的主要受體包括fms樣酪氨酸激酶VEGFR-1(Fms–liketyrosine即Flt-1)、胎兒肝激酶插入區受體VEGFR–2(Kinase insert domain-containingreceptor即KDR/Flk-1)和VEGFR–3(Flt-4)，三者均具有酪氨酸活性。其中，VEGFR-2主要分布在血管內皮細胞，也分布在造血干細胞、巨噬細胞等，它的主要作用是介導VEGF的血管內皮細胞增生，趨化內皮細胞和增加血管通透性等功能，因此，其是VEGF的主要功能受體。深入理解VEGFR-2的結構與功能以及它在新生血管生成過程中的調控機制有利于理解相關病理生理現象，并對相關疾病的治療起指導作用。

人VEGFR-2又名激酶插入區受體(kinase domain receptor,KDR)，其編碼基因位于4q12，編碼了1356個氨基酸，是一分子量為230kD的跨膜糖蛋白。VEGFR-2是一酪氨酸激酶跨膜蛋白，分為胞外區、跨膜區和胞內激酶活性區，其胞外區有7個免疫球蛋白樣的結構區域(Ig-like domain)，這7個區分別有著不同的功能。VEGF和VEGFR-2受體作為關鍵的血管內皮細胞特異因子信號傳導途徑的分子參與腫瘤新生血管的生成，VEGF的主要生物學功能都是通過VEGFR-2實現，VEGFR-2和VEGF結合后發生二聚體化，并且VEGFR-2胞內的酪氨酸殘基自身磷酸化，從而激活并將細胞膜/細胞質激酶級聯反應信號傳遞到細胞核，可引發內皮細胞的一系列變化，包括血管內皮細胞增殖、存活、細胞骨架重排、細胞遷移以及基因表達等，并最終引起血管增生。