[發明專利]一種茶多酚涂層的大豆分離蛋白-季銨鹽殼聚糖微膠囊的制備方法

有效

• 申請號: 202010950930.9
• 申請日: 2020-09-11
• 公開（公告）號: CN111991368B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 曹崇江;姚文一;程搖藍
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K9/52
• 分類號: A61K9/52;A61K47/42;A61K47/36;A61K47/22;A61K31/352
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 曹坤

本發明公開了一種具有茶多酚涂層的大豆分離蛋白?季銨鹽殼聚糖微膠囊的制備方法，先通過氯化鈣與碳酸鈉溶液的混合生成碳酸鈣微粒作為微膠囊制備的模板，再通過層層自組裝的方式，按順序向碳酸鈣的分散液中加入大豆分離蛋白與季銨鹽殼聚糖溶液，得到了具有多層包裹結構的殼聚糖?大豆分離蛋白微膠囊，微膠囊離心洗滌后，用EDTA溶液去除碳酸鈣模板，并加入茶多酚溶液進行涂層，最終得到了目標微膠囊。將微膠囊用于葛根素的包埋與體外釋放。結果表明：茶多酚涂層的微膠囊對于葛根素在不同PH條件下的的釋放具有緩釋效果，能提高葛根素的生物利用度。

技術領域

本發明涉及生物材料技術領域，具體涉及一種茶多酚涂層的大豆分離蛋白- 季銨鹽殼聚糖微膠囊的制備方法。

背景技術

葛根素來源于中國傳統藥食同源的中藥材葛根，具有多種生理活性，已作為功能保健成分在市場上銷售，但直接服用葛根素對胃部刺激嚴重且生物利用度較低。

大豆蛋白是一種優質廉價的植物蛋白質，能滿足人類營養補給和生長發育的需求，已經廣泛應用于食品加工技術領域，由于其等電點4.5左右，所以在生理條件下該蛋白呈現負電性，可以與帶有正電荷的生物大分子形成靜電復合物從而自組裝成微膠囊對食品功能分子進行包埋和遞送，目前針對該蛋白在功能分子的遞送方面已有大量的研究。

殼聚糖作為自然界唯一的天然陽離子多糖，具有抑菌、抗炎、免疫調節等多種生理活性，同時具備安全無毒可食用的特點，已在食品添加劑領域廣泛應用。通過對殼聚糖進行結構修飾得到的季銨鹽殼聚糖具有良好的生物安全性和良好的抗菌性、成膜性、陽離子吸附性、吸濕保濕性、絮凝性、抗靜電性等性能。其抗菌性能優于殼聚糖及其它殼聚糖衍生物。

利用殼聚糖與大豆分離蛋白在生理條件下通過靜電作用可以形成多糖-蛋白質復合物的原理，在生物醫學和食品功能領域已經對生物活性成分的包埋遞送有了深入的研究。

目前多糖-蛋白復合物在藥物遞送方面的研究仍然面臨著遞送過程中藥物封裝泄露率高的問題，如何提高藥物的包封率以及釋放過程中的穩定性仍然需要通過進一步的研究來改善，而在食品技術領域，包封材料的安全性也是首先需要考慮的問題。目前通過碳酸鈣模板法制備層層自組裝的生物大分子微膠囊的方法已經得到了廣泛的研究，但是鮮有研究對制備得到的微膠囊再次進行涂層裝載的研究。本實驗采用天然產物活性分子茶多酚對微膠囊進行了二次涂層，對微膠囊的結構和物理化學性能進行了初步表征，并對微膠囊對模式分子藥物的包封、裝載、釋放等載藥性能進行了驗證，開發了一種具有PH響應特點的生物微膠囊，為開發生物大分子為基質的藥物遞送系統提供了實驗依據。

發明內容

針對上述問題，本發明提供了一種茶多酚涂層的大豆分離蛋白-季銨鹽殼聚糖微膠囊的制備方法。

本發明的技術方案是：一種具有茶多酚涂層的大豆分離蛋白-殼聚糖微膠囊的制備方法，具體操作步驟如下：

步驟(1.1)、將氯化鈣和碳酸鈉分別配置成溶液，然后混合攪拌、靜置15min、真空抽濾去除上清液，用純化水洗滌，收集顆粒產物，冷凍干燥后得到碳酸鈣微粒；

步驟(1.2)、將碳酸鈣顆粒加入至大豆分離蛋白溶液中，攪拌后將混懸液進行真空抽濾，所得顆粒離心洗滌；

步驟(1.3)、將離心洗滌所得的顆粒加入到季銨鹽殼聚糖溶液中，攪拌后將混懸液進行真空抽濾，所的顆粒離心洗滌；

步驟(1.4)、重復步驟(1.2)及(1.3)，至碳酸鈣模板表面沉積所需聚合物涂覆層數后，將所得樣品加入到葛根素溶液當中，攪拌過夜，然后將沉淀離心洗滌，得到裝載葛根素的大豆分離蛋白-季銨鹽殼聚糖微膠囊；

步驟(1.5)、將裝載葛根素的大豆分離蛋白-季銨鹽殼聚糖微膠囊收集并分別加入到不同濃度梯度的茶多酚溶液當中，攪拌完成后離心洗滌以去除膠囊表面殘留的茶多酚溶液，將離心所得樣品進行冷凍干燥，制得干燥的茶多酚涂層的微膠囊；