[發(fā)明專利]血液纖維蛋白溶解功能檢測方法

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• 申請日: 2020-09-09
• 公開（公告）號: CN112067575A
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發(fā)明（設計）人: 吳俊
• 申請（專利權）人: 吳俊
• 主分類號: G01N21/3577
• 分類號: G01N21/3577
• 代理公司: 天津市新天方專利代理有限責任公司 12104
• 代理人: 尹小蓮

1.血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，包括步驟如下：

a配備實驗組試劑和對照組試劑

實驗組試劑包括待檢測的血漿、actin試劑、凝血酶和組織型纖溶酶原激活物試劑；

對照組試劑包括待檢測的血漿、actin試劑、凝血酶和蒸餾水；

b吸光度檢測

在進行吸光度檢測之前，分別將實驗組試劑和對照組試劑各自進行混合，利用光密度掃描儀每隔10秒鐘檢測980nm波長下實驗組試劑和對照組試劑的吸光度變化；利用光密度掃描儀自動繪制出實驗組試劑和對照組試劑內血漿吸光度值隨時間變化的曲線；將實驗組試劑的吸光度值減去對照組試劑的吸光度值，可以得到不同時間點的吸光度差值，繼而描記吸光度差值隨時間變化的曲線，并計算曲線的一階導數；

c確定參數

(1)纖溶能力，反映樣本的綜合纖溶能力，即一階導數曲線下兩個零點之間的面積，LP＝Log10(面積×100)；

(2)纖溶時間(min)，表示凝塊被纖溶酶降解的最大速率，定義為一階導數曲線下一階導數的極值點與第一個零點之間的時間差；

根據LP和LT的值，可以量化評估血液纖維蛋白溶解功能。

2.根據權利要求1所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟a中，血漿與actin試劑體積之比為1：1。

3.根據權利要求1所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟a中，實驗組試劑和對照組試劑分別盛放到96孔透明板的兩個試劑孔內，盛放實驗組試劑的試劑孔稱為實驗孔，盛放對照組試劑的試劑孔稱為對照孔，試劑孔內液體最佳檢測體積為200ul，故血漿與上述4種試劑的總體積定為200ul，實驗孔中200ul的檢測體積共包括：血漿70ul，actin試劑70ul，凝血酶20ul，tPA20 ul，對照孔中用同體積的蒸餾水代替tPA，200ul的檢測體積共包括：血漿70ul，actin試劑70ul，凝血酶20ul，蒸餾水20ul，鈣離子20ul。

4.根據權利要求2所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟a中，凝血酶的濃度為0.5IU/ml，組織型纖溶酶原激活物的濃度為600ng/ml，鈣離子溶液的濃度為0.025mol/L。

5.根據權利要求3所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟a中，actin試劑為腦磷脂和鞣花酸的混合物。

6.根據權利要求1所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟b中，血漿為冰凍乏血小板血漿時，需在37℃下溫浴5min。

7.根據權利要求6所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟b中，實驗在37℃下進行，持續(xù)檢測吸光度變化的時間為2小時。

8.根據權利要求3所述的血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，其特征在于，步驟b中，實驗孔和對照孔均可設有多個，光密度掃描儀對多個實驗孔的吸光度值取平均值，利用平均值繪制出實驗孔內血漿吸光度值隨時間變化的曲線，光密度掃描儀對多個對照孔孔的吸光度值取平均值，利用平均值繪制出對照孔內血漿吸光度值隨時間變化的曲線。