[發明專利]血液纖維蛋白溶解功能檢測方法

在審

• 申請號: 202010941978.3
• 申請日: 2020-09-09
• 公開（公告）號: CN112067575A
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 吳俊
• 申請（專利權）人: 吳俊
• 主分類號: G01N21/3577
• 分類號: G01N21/3577
• 代理公司: 天津市新天方專利代理有限責任公司 12104
• 代理人: 尹小蓮

本發明是血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，包括步驟如下：a配備實驗組試劑和對照組試劑；b吸光度檢測；c計算纖溶能力值和纖溶時間值。本發明可以直接檢測血液纖溶功能；本發明操作相對簡單；可以量化評估血液纖維蛋白溶解功能，即反映纖溶能力和纖溶時間；傳統纖溶標志物如FDP，D二聚體等非特異性很高，受到炎癥、出血，血栓負荷等影響，本發明可以反映真實纖溶能力，特異性很高。此外，本發明不受血液乳糜、黃疸、溶血等因素影響，抗干擾能力強。

技術領域

本發明涉及血液纖維蛋白溶解功能檢測技術領域，尤其涉及血液纖維蛋白溶解功能檢測方法。

背景技術

血液凝固后形成纖維蛋白團塊，需要纖溶系統將其溶解，使得血管再通。纖溶功能減弱，會導致血栓形成，如先天性纖溶缺陷引起的靜脈血栓，骨科術后纖溶減低引起的靜脈血栓形成。纖溶亢進時，會引起出血，如創傷后出血，泌尿系手術后出血，產科重癥出血等都和纖溶亢進有關。腫瘤患者可以表現為纖溶抑制或者纖溶亢進，臨床上可以出血或者血栓形成。

血液系統是由凝血系統、抗凝系統、纖溶系統維持平衡?；颊呒炔粫鲅⒁膊粫纬裳?。目前纖溶系統檢測都是測定的標志物間接反映纖溶狀態，不能代表纖溶活性。目前市場上已有的纖溶產品有血栓彈力圖Ly30，纖維蛋白降解產物FDP，D二聚體，以及纖溶標志物組織型纖溶酶原激活物-抑制物復合物tPAIC，纖溶酶-抗纖溶酶復合物PIC。他們都是間接檢測纖溶活化分子，來代表纖溶活化程度，其非特異性很高，受到炎癥、出血，血栓負荷等影響，不是纖溶功能檢測。

現有纖溶標志物的檢測，不能代表實時纖溶功能水平。因為纖溶標志物濃度取決于底物濃度，酶濃度，肝腎功能代謝影響，因此不能反映實時纖溶酶活性。

發明內容

本發明旨在解決現有技術的不足，而提供血液纖維蛋白溶解功能檢測方法。

本發明為實現上述目的，采用以下技術方案：血液纖維蛋白溶解功能檢測方法，包括步驟如下：

a配備實驗組試劑和對照組試劑

實驗組試劑包括待檢測的血漿、actin試劑、凝血酶和組織型纖溶酶原激活物試劑(tPA)；

對照組試劑包括待檢測的血漿、actin試劑、凝血酶和蒸餾水；

b吸光度檢測

在進行吸光度檢測之前，分別將實驗組試劑和對照組試劑各自進行混合，利用光密度掃描儀每隔10秒鐘檢測980nm波長下實驗組試劑和對照組試劑的吸光度變化；利用光密度掃描儀自動繪制出實驗組試劑和對照組試劑內血漿吸光度值隨時間變化的曲線；將實驗組試劑的吸光度值減去對照組試劑的吸光度值，可以得到不同時間點的吸光度差值，繼而描記吸光度差值隨時間變化的曲線，并計算曲線的一階導數；

c確定參數

(1)纖溶能力(lysispotential，LP)，反映樣本的綜合纖溶能力，即一階導數曲線下兩個零點之間的面積，LP＝Log10(面積×100)；

(2)纖溶時間(lysistime，LT)(min)，表示凝塊被纖溶酶降解的最大速率，定義為一階導數曲線下一階導數的極值點與第一個零點之間的時間差；

根據LP和LT的值，可以量化評估血液纖維蛋白溶解功能。

步驟a中，血漿與actin試劑體積之比為1：1。