[發明專利]一種來源于牡丹籽粕的ACE抑制肽

有效

• 申請號: 202010941644.6
• 申請日: 2020-09-09
• 公開（公告）號: CN111995659B
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 洪晶;陳秋鑾;陳雪芹;孟春
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07K5/097
• 分類號: C07K5/097;C12P21/06;C07K1/20;C07K1/16;A61K38/06;A61P9/12;A23L33/18
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

本發明公開了一種牡丹籽粕ACE抑制肽及其制備方法。所述ACE抑制肽氨基酸序列為His?Trp?Ser（HWS），體外實驗表明，該多肽具有良好的ACE抑制活性，IC₅₀為0.64 mg/mL。本發明所涉及的ACE抑制肽具有結構簡單、安全、活性強等特點，易于進行生產，可用于制備高血壓預防藥物，或者作為功能食品添加劑供高血壓患者食用。

技術領域

本發明涉及一種來源于牡丹籽粕的ACE抑制肽，屬于食品生物技術領域。

背景技術

研究調查表明高血壓影響到全世界約25%的成人人口，預計在2025年高血壓患病率將增加29%，屆時將有15.6億人受到影響。高血壓是一種心血管病綜合征，也是危及人們心血管疾病的主要因素之一，其常伴隨其他病癥，如動脈粥樣硬化、心肌梗死和中風等。血管緊張素轉換酶（ACE）是一類含鋅的二肽羧基肽酶，它主要存在于肺和一些器官中。血管緊張素轉換酶在參與高血壓調節起到重要的作用，參與腎素-血管緊張素系統（RAS）和激肽釋放酶-激肽系統（KKS），使血壓升高。ACE抑制劑能夠通過抑制或降低ACE酶活性達到降低血管緊張素II的生成，并避免激肽、緩激肽的失活，起到調節血壓的作用。常見的ACE 抑制劑藥物有卡托普利、苯那普利、依那普利、培哚普利等，但是臨床上顯示長期服用降壓藥，會有咳嗽、血管性水腫、頭痛等不良反應。因此，食源的降壓肽因其具有天然、安全性高、易吸收、無副作用的特點而備受關注。

牡丹籽粕是牡丹籽榨油后副產物，大多丟棄或者作為動物飼料，生物利用率低。牡丹籽粕中蛋白含量為18%-35%，其中的必需氨基酸含量與大豆相似，具有很高的營養價值，可作為天然活性肽的良好來源。牡丹籽粕中蛋白質的高效利用對提高牡丹籽粕的附加值具有重要作用。牡丹籽粕中蛋白質的提取并酶解生產制備ACE抑制肽方面的研究開發，能夠對牡丹籽粕進行有效地利用，提高牡丹籽的附加價值，實現資源的綜合利用。

發明內容

本發明的目的是提供一種來源于牡丹籽粕的ACE抑制肽。

為實現上述目的，采用以下技術方案：

本發明提供一種ACE抑制肽，其氨基酸序列為His-Trp-Ser，縮寫為HWS，即由組氨酸-色氨酸-絲氨酸3個基酸殘基構成。

進一步，所述ACE抑制肽來自于牡丹籽天然提取或人工氨基酸合成。

本發明提供一種所述ACE抑制肽的制備方法，包括如下步驟，

1）牡丹籽粕蛋白酶解產物的制備：牡丹籽粕經粉碎后，經石油醚脫脂干燥后過篩備用；采用堿提酸沉法得到牡丹籽粕蛋白，采用中性蛋白酶將其在酶解條件：底物濃度2%（w/v）、pH 7.50、酶添加量7200 U/g、溫度43 ℃，酶解時間2 h，酶解后沸水浴10 min滅活，冷卻至室溫后，調節pH至中性后于4℃10000 rpm離心20 min，取上清液冷凍干燥，即為牡丹籽粕蛋白質酶解產物。

2）牡丹籽粕蛋白的酶解產物利用Sephadex G-25凝膠色譜進行分離，以去離子水為洗脫液，流速0.3 mL/min，測量洗脫組分214nm波長處的吸光值；收集具有最佳ACE抑制活性的峰，利用反相高效液相色譜（RP-HPLC）進一步分離；RP-HPLC的洗脫梯度為0-3 min，5%（V/V）乙腈（含0.1%三氟乙酸）；3-43 min，5%-40%（V/V）乙腈（含0.1%三氟乙酸）；43-53 min，40%（V/V）乙腈（含0.1%三氟乙酸）；流速為2.0 mL/min，檢測波長214nm，收集洗脫時間為19-21 min的洗脫峰，真空冷凍干燥即得所述ACE抑制肽。

所述ACE抑制肽鑒定是通過LC-MS/MS對活性肽進行氨基酸序列鑒定。

本發明的優點在于：