[發(fā)明專利]一種純化學(xué)亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010933892.6
• 申請日: 2020-09-08
• 公開（公告）號(hào): CN112126670A
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周正;崔生輝;周亮;馮軍燕;王世飛
• 申請（專利權(quán)）人: 遵義醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/04
• 分類號(hào): C12Q1/04;C12N1/02;C12N1/20;C12R1/42
• 代理公司: 遵義市創(chuàng)先知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 52118
• 代理人: 劉創(chuàng)先

1.一種純化學(xué)亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于，所含成分及質(zhì)量濃度如下：

2.如權(quán)利要求1所述純化學(xué)亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制作母液

按成分稱取10倍濃度的氨基酸和維生素，分別溶于200mL蒸餾水中，制成氨基酸母液和維生素母液；同樣的方法稱取無機(jī)鹽，先將氯化鉀、磷酸氫二鈉和硫酸鎂溶于200mL蒸餾水中，混合均勻后再加入四水硝酸鈣，攪拌均勻后制成無機(jī)鹽母液；

(2)制作替代物

分別取步驟(1)中氨基酸母液20mL、維生素母液20mL和無機(jī)鹽母液20mL，混勻，制備成牛肉膏和蛋白胨替代物；

(3)制作培養(yǎng)基

取葡萄糖1g、硫酸亞鐵0.06g、磷酸氫二鈉0.8g、亞硫酸鈉1.2g、檸檬酸鉍銨0.4g、0.1％煌綠5支和瓊脂3.8g，先將步驟(2)與葡萄糖混勻溶解，再將硫酸亞鐵、檸檬酸鉍銨、磷酸氫二鈉、亞硫酸鈉分別加入10mL蒸餾水，加熱攪拌溶解，同時(shí)100mL蒸餾水與瓊脂攪拌煮沸溶解；最后混勻硫酸亞鐵、檸檬酸鉍銨、磷酸氫二鈉、亞硫酸鈉溶液后傾倒入步驟(2)中，混勻后立即與煮沸的瓊脂攪拌，待溶液冷卻到50-60℃時(shí)將pH調(diào)至7.5迅速倒入0.1％煌綠5支，混合均勻后既得自制的200mL亞硫酸鉍瓊脂純化學(xué)成分合成培養(yǎng)基，傾注平板備用。

3.如權(quán)利要求2所述純化學(xué)亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特征在于，用于培養(yǎng)大腸埃希氏桿菌CMCC44102、鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和傷寒沙門菌CMCC50071。

4.如權(quán)利要求3所述純化學(xué)亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特征在于，菌懸液的制備及接種：分別取CMCC44102、CMCC50071和ATCC14028菌株接種到營養(yǎng)肉湯中，36℃下培養(yǎng)18h-24h，制成菌液濃度為200-2000CFU/mL，用1μL接種環(huán)取選擇性測試工作菌懸液1環(huán)，在待測培養(yǎng)基和參比平板表面劃六條平行直線，平行接種兩個(gè)平板，36℃下培養(yǎng)18h-24h。