[發(fā)明專利]一種葡萄糖生物傳感器

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010933697.3
• 申請(qǐng)日: 2020-09-08
• 公開（公告）號(hào): CN114152656A
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高志強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 三諾生物傳感股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N27/327
• 分類號(hào): G01N27/327;G01N27/30;G01N27/48
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 劉猛

1.一種葡萄糖生物傳感器，其特征在于，包括基體和位于基體上的電極；所述電極上涂覆有葡萄糖傳感膜；所述葡萄糖傳感膜按照如下制備方法制備獲得：

將葡萄糖脫氫酶在含有尿素或鹽酸胍的緩沖液中孵育，將葡萄糖脫氫酶充分展開，暴露出其分子表面和內(nèi)部的游離羧基和氨基，然后加入帶有游離羧基或氨基的釕或鋨的絡(luò)合物以及第一交聯(lián)劑進(jìn)行反應(yīng)，獲得化學(xué)修飾的葡萄糖脫氫酶，使得葡萄糖脫氫酶可以和電極進(jìn)行快速、直接的電子交換，然后進(jìn)一步通過(guò)第二交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)，獲得具有電化學(xué)活性的葡萄糖傳感膜。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述生物傳感器，其特征在于，還包括在交進(jìn)一步通過(guò)第二交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)前將獲得化學(xué)修飾的葡萄糖脫氫酶再次進(jìn)行修飾：

將經(jīng)過(guò)第一次化學(xué)修飾的葡萄糖脫氫酶在含有尿素或鹽酸胍的緩沖液中孵育，將葡萄糖脫氫酶充分展開，暴露出其分子表面和內(nèi)部的游離羧基和氨基，然后加入帶有游離氨基或羧基的釕或鋨的絡(luò)合物以及第一交聯(lián)劑進(jìn)行反應(yīng)，獲得第二次化學(xué)修飾的葡萄糖脫氫酶，相比第一次化學(xué)修飾的葡萄糖脫氫酶能與電極進(jìn)行更加快速的電子交換；。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述生物傳感器，其特征在于，還包括在與第一交聯(lián)劑反應(yīng)之后利用超濾袋透析對(duì)修飾的葡萄糖脫氫酶進(jìn)行分離和提純。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述生物傳感器，其特征在于，所述第一交聯(lián)劑為碳化二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述生物傳感器，其特征在于，所述第二交聯(lián)劑為雙功能化學(xué)交聯(lián)劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述生物傳感器，其特征在于，所述雙功能化學(xué)交聯(lián)劑選自戊二醛、1,4-丁二醇二縮水甘油醚,聚(二甲基硅氧烷)-二縮水甘油醚、四環(huán)氧丙基-4，4-二氨基二苯甲烷,聚乙二醇二縮水甘油醚和4-(2,3-環(huán)氧丙氧基)-N,N-二(2,3-環(huán)氧丙基)苯胺中的一種或多種。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)所述生物傳感器，其特征在于，還包括覆蓋于所述葡萄糖傳感膜表面的生物相容膜。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述生物傳感器，其特征在于，所述生物相容膜為丙烯酸酯、丙烯酸酯衍生物中的一種或兩種組合制備的共聚物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述生物傳感器，其特征在于，所述生物相容膜為聚甲基丙烯酸羥乙酯。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述生物傳感器，所述生物相容膜采用如下方法制備獲得：

無(wú)氧條件下，甲基丙烯酸羥乙酯、乙醇溶液和Na₂S₂O₈在密閉環(huán)境下反應(yīng)生成聚甲基丙烯酸羥乙酯，然后加入丙酮沉淀出聚甲基丙烯酸羥乙酯，然后利用乙醇溶解、丙酮沉淀的方式反復(fù)多次處理，最后干燥分離獲得的聚甲基丙烯酸羥乙酯。