[發明專利]一種毒種凍干粉儲存方法

在審

• 申請號: 202010925941.1
• 申請日: 2020-09-07
• 公開（公告）號: CN111849926A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 張永深
• 申請（專利權）人: 威世藥業（如皋）有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12R1/93
• 代理公司: 北京權智天下知識產權代理事務所(普通合伙) 11638
• 代理人: 李海燕

本發明公開了一種毒種凍干粉儲存方法，其具體操作方法包含以下步驟：A、痘苗病毒液的取樣、分裝；B、痘苗病毒液的預處理；C、痘苗病毒液的干燥處理；D、痘苗病毒液凍干結束及保存；E、凍干毒種的檢定；F、病毒凍干后穩定性考察，本發明提供一種能夠降低運行成本和能耗，可以長時間儲存于4℃~25℃且便于轉送，比毒種液在?80℃下保存具有明顯的優勢，可以提高病毒傳代的遺傳穩定性，減少傳代次數，降低生產成本，在相關的學術研究上和實際生產中，具有開創性的意義和應用價值。

技術領域

本發明涉及毒種凍干粉儲存技術領域，具體為一種毒種凍干粉儲存方法。

背景技術

動物免疫用的痘苗病毒液是家兔睪丸接種后獲得的含痘苗病毒的兔睪丸組織培養物，該組織混懸液于-80℃超低溫冷柜中保存，有效期限為24個月，在實際生產中，冷凍的病毒液被適當稀釋后用于兔皮注射來生產相關的藥物，這種保存方式，使痘苗病毒傳代的次數較多，生產成本較高，帶來病毒變異的風險。

冷凍干燥技術是目前保持微生物、動物組織、細胞及蛋白質等活性物質生物活性的一個有效、普遍的方法，冷凍真空干燥活疫苗是將活疫苗分裝后放入冷凍真空干燥機中，經預先凍結，在低溫和真空條件下使水分升華及干燥成疏松多孔狀和體積不變的干燥制品，由于凍干是在低溫真空狀態下完成的，可以保護蛋白質不變性，減少氧化環節，使微生物和某些酶活性不受影響，同時凍干疫苗在真空狀態下封口保存，其代謝活動降低，處于休眠狀態，從而能長時間存活，具有保存時間長、使用時加稀釋液能迅速溶解、復原性狀不變等優點，是目前活疫苗最常用的保存方法，凍干品可以長時間儲存于4℃~25℃且便于傳送，比毒種液在-80℃下保存具有明顯的優勢，可以提高病毒傳代的遺傳穩定性，減少傳代次數，降低生產成本。

綜上所述，改良以及優化毒種凍干的儲存方法降低運行成本和能耗是當前急需解決的難題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠降低運行成本和能耗，可以長時間儲存于4℃~25℃且便于轉送的毒種凍干粉儲存方法。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種毒種凍干粉儲存方法其具體操作方法包含以下步驟：

A、痘苗病毒液的取樣、分裝；

B、痘苗病毒液的預處理；

C、痘苗病毒液的干燥處理；

D、痘苗病毒液凍干結束及保存；

E、凍干毒種的檢定；

F、病毒凍干后穩定性考察。

作為優選，根據步驟A痘苗病毒液的取樣、分裝：

a、分批取出超低溫冷凍的病毒液；

b、在生物安全柜中精密量取數毫升于專用的滅菌西林瓶中；

c、寬松地塞上有凹槽的橡膠塞。

作為優選，根據步驟B痘苗病毒液的預處理：

a、分裝結束后迅速將凍干西林瓶放入冷凍干燥機中；

b、分批次記錄時間、數量及冷凍編號。

作為優選，根據步驟C痘苗病毒液的干燥處理：

a、低壓真空下按設定的隔板溫度啟動加熱程序；

b、當物料溫度達到接近環境時再穩定數小時，以保證樣品充分干燥。

作為優選，根據步驟D痘苗病毒液凍干結束及保存：

a、壓緊瓶塞，取出凍干瓶；

b、消毒外表面，軋上鋁蓋做長期保存；

c、于2～8°C避光保存。