[發明專利]一種針對新冠病毒SARS-CoV-2棘突蛋白非RBD區的單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 202010921453.3
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN111961133B
• 公開（公告）日: 2021-03-23
• 發明（設計）人: 董金華;陳麗梅;李海梅
• 申請（專利權）人: 濰坊醫學院
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;G01N33/577;G01N33/569;A61K39/42;A61P31/14;A61P11/00
• 代理公司: 山東濟南齊魯科技專利事務所有限公司 37108
• 代理人: 張娟

本發明公開了一種針對新冠病毒SARS?CoV?2棘突蛋白非RBD區的單克隆抗體及其應用，該單克隆抗體與新冠病毒SARS?CoV?2刺突糖蛋白RBD區特異性結合，包括重鏈可變區的互補性決定區CDRH1、CDRH2、CDRH3和輕鏈可變區的互補性決定區CDRL1、CDRL2、CDRL3；本發明的針對新冠病毒SARS?CoV?2棘突蛋白非RBD區的單克隆抗體，效價高、特異性強，可以高效表達，能與新冠病毒SARS?CoV?2表面的刺突蛋白RBD區以外的區域特異性結合，用于新冠病毒SARS?CoV?2的定性或定量檢測，并且能夠中和一定的新冠病毒毒性，減弱病毒毒性，起到預防或/和治療新冠病毒肺炎的作用。

技術領域

本發明涉及細胞免疫學、分子生物學技術領域，具體來說是一種針對新冠病毒SARS-CoV-2棘突蛋白非RBD區的單克隆抗體及其應用。

背景技術

新冠病毒SARS-CoV-2，屬于冠狀病毒科(Coronaviridae)，正冠狀病毒亞科(Orthocoronavirinae)的β冠狀病毒屬(Coronavirus)，與嚴重急性呼吸綜合征相關冠狀病毒(SARS-CoV)和中東呼吸綜合征相關冠狀病毒(MERS-CoV)近緣，都會導致嚴重肺炎癥狀。人感染新冠病毒后常見的臨床癥狀主要有發熱、乏力，呼吸道癥狀以干咳為主，并逐漸呼吸困難，嚴重者急性呼吸窘迫癥、難以糾正的代謝性酸中毒和出凝血功能障礙等。

SARS-CoV-2病毒是一種單股正鏈RNA病毒，是已知基因組最大的RNA病毒之一，大約包含2.6～3.2萬堿基，其基因組依次編碼核蛋白(Nucleoprotein)、包膜蛋白(Envelopeprotein)、膜蛋白(Membrane protein)及棘突蛋白(Spike protein，又稱S-protein或S蛋白)，其中棘突蛋白是其表面最重要的蛋白，其主要功能為決定病毒的宿主范圍和特異性，與宿主細胞細胞膜受體結合并融合，實現對細胞的感染。棘突蛋白具有兩個亞基S1和S2，S1中的受體結合區(Receptor binding domain，RBD)，與人類SARS-CoV受體血管緊張素轉化酶II(ACE2)分子互作，而S2則含有膜融合過程所需要的基本元件，實現病毒與細胞的融合。因此S蛋白的人源單克隆抗體理論上可以阻斷病毒跟細胞的結合，具有減弱病毒傳染的能力，可以作為抗體藥物用于治療新冠病毒肺炎患者。

抗體是哺乳動物免疫系統中的一個重要糖蛋白分子。抗體分子由兩條重鏈(Heavychain)和兩條輕鏈(Light chain)組成，其中重鏈由分為可變區(Variable region ofheavy chain，VH)和三個恒定區(Constant region of heavy chain；CH1，CH2，CH3)，輕鏈則由一個可變區(VL)和一個恒定區(CL)組成。可變區具有跟抗原結合的功能，因抗體個體不同而不同，而抗體的恒定區則因抗體的種屬及亞型不同而不同。抗體重鏈可變區包含三個互補決定區(Complementarity-determining regions；CDRH1，CDRH2，CDRH3)，輕鏈可變區也包含三個互補決定區，即CDRL1，CDRL2，和CDRL3，互補決定區又稱為高變區，直接與抗原的表位結合。

目前針對新冠肺炎的治療有多種方案，但并沒有針對新冠病毒的特異性的治療藥物和疫苗上市，由于抗體藥物在傳染病、自身免疫等疾病的治療上發揮了重要作用，也給我們研究針對病毒的抗體提供了理論支持，因此開發針對新冠病毒SARS-CoV-2棘突蛋白非RBD區的單克隆抗體具有非常重要的意義。

發明內容

為解決上述問題，本發明的目的是提供一種針對新冠病毒SARS-CoV-2棘突蛋白非RBD區的單克隆抗體及其應用。

本發明為實現上述目的，通過以下技術方案實現：