[發(fā)明專利]用于豬偽狂犬滅活疫苗的復合免疫增強劑及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010919910.5
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN111956798B
• 公開（公告）日: 2023-03-03
• 發(fā)明（設計）人: 于曉明;陳瑾;侯立婷;張元鵬;鄭其升;侯繼波
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學院
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/245;A61P31/22;A61P37/04
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 袁靜

本發(fā)明提供用于豬偽狂犬滅活疫苗的復合免疫增強劑及其應用，涉及到疫苗制造領域。該復合免疫增強劑，含有羧甲基茯苓多糖、透明質(zhì)酸和α?GC。本發(fā)明還提供所述復合免疫增強劑在豬偽狂犬滅活疫苗中的應用。本發(fā)明復合免疫增強劑，能夠提高偽狂犬滅活疫苗免疫后的抗體水平，顯著提高對近年流行的偽狂犬變異毒株的保護力。

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及到疫苗制造領域，具體涉及用于豬偽狂犬滅活疫苗的復合免疫增強劑及其應用。

背景技術(shù)

偽狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)屬于皰疹I型雙股DNA病毒，其感染癥狀主要體現(xiàn)在神經(jīng)、生殖系統(tǒng)兩個方面。仔豬最容易遭受感染感染且表現(xiàn)最為敏感，容易發(fā)生中樞神經(jīng)癥狀，偽狂犬病的死亡率可高達到100％。起初，仔豬食欲下降，精神沉郁，渾身乏力，24h內(nèi)后表現(xiàn)出中樞神經(jīng)癥狀，如共濟失調(diào)、顫抖、流涎等，仔豬會出現(xiàn)后肢癱瘓，轉(zhuǎn)圈、劃水動作，仔豬一般在發(fā)病后36h內(nèi)發(fā)生死亡。懷孕母豬感染PRV導致死胎或者流產(chǎn)，懷孕四個月到九個月的母豬感染PRV會發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)生死胎和弱仔；懷孕三個月的母豬感染以后會在子宮內(nèi)把胎兒吸收。偽狂犬病毒在宿主外周神經(jīng)系統(tǒng)中建立潛在感染，當潛在病毒被重新激活或者受到壓力刺激就會產(chǎn)生感染性病毒。在刺激因素的作用下潛伏感染的動物會激活并且釋放病毒，刺激因素有飼養(yǎng)條件差，分群轉(zhuǎn)欄，車輛運輸，共感染其他病原等。

疫苗接種是該病常規(guī)的預防方法。偽狂犬滅活疫苗是將偽狂犬病毒在細胞上進行增殖，將病毒滅活后制成滅活疫苗。由于將病毒滅活就不存在潛伏感染和毒力返強的可能，因此安全性很高。但是，由于偽狂犬滅活疫苗的免疫原性差，滅活疫苗不能在體內(nèi)復制，無法向宿主免疫系統(tǒng)遞呈內(nèi)源性蛋白抗原，也不可以誘導細胞毒性T細胞反應，因此免疫后抗體陽性率低、抗體水平低。

現(xiàn)有技術(shù)中，缺乏能夠高效提升偽狂犬滅活疫苗免疫后抗體水平的免疫增強劑。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供用于豬偽狂犬滅活疫苗的復合免疫增強劑，能夠提高偽狂犬滅活疫苗免疫后的抗體水平，顯著提高對近年流行的偽狂犬變異毒株的保護力。

本發(fā)明的目的采用如下技術(shù)方案實現(xiàn)：

用于豬偽狂犬滅活疫苗的復合免疫增強劑，含有羧甲基茯苓多糖、透明質(zhì)酸和α-GC。

在本發(fā)明中，該復合免疫增強劑中羧甲基茯苓多糖、透明質(zhì)酸和α-GC的濃度比為1:3-10:1-40。

本發(fā)明還提供所述復合免疫增強劑在豬偽狂犬滅活疫苗中的應用。

本發(fā)明還提供含有所述復合免疫增強劑的豬偽狂犬滅活疫苗，所述豬偽狂犬滅活疫苗中含有1～20mg/mL羧甲基茯苓多糖、1～6μg/mL透明質(zhì)酸和0.1～1000μg/mL的α-GC。

本發(fā)明還提供所述豬偽狂犬滅活疫苗的制備方法，包括如下步驟：

(1)將羧甲基殼聚糖、透明質(zhì)酸和α-GC溶解于豬偽狂犬滅活病毒液中，得到水相溶液；

(2)將所述水相溶液與油相溶液混合、乳化，得到滅活疫苗。

在本發(fā)明中，步驟(2)中所述油相為ISA 206佐劑。

在本發(fā)明中，所述水相與油相的體積比為1:0.5-1.5。

在本發(fā)明中，所述水相溶液中羧甲基茯苓多糖、透明質(zhì)酸和α-GC的濃度分別為2～40mg/mL、2～12μg/mL和0.2～2000μg/mL。

本發(fā)明中復合免疫增強劑也可以用于豬圓環(huán)病毒、豬細小病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬口蹄疫病毒、豬藍耳病毒等滅活病毒疫苗，具有一定的提高免疫效果的作用。

本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)，具有以下優(yōu)點：