[發明專利]一種檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法

在審

• 申請號: 202010919335.9
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN111999418A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 賀曉云;高素蘭;孫艷麗;周秀芝;劉清亮
• 申請（專利權）人: 山東拜爾檢測股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 北京惠智天成知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11681
• 代理人: 袁瑞紅

1.一種檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，其特征在于，所述蘇丹紅為蘇丹紅I、II、III、IV，所述方法包括如下步驟：

(1)待測樣品前處理：

A.提取

稱取2.00g樣品置于50mL離心管中，加入8mL純乙腈，渦旋勻混5min，超聲震蕩10min，9000r/min離心5min，取上清液于另一50mL離心管中；殘渣用8mL乙腈洗滌，重復兩次，合并上清液，振蕩均勻；

B.提取液凈化

用純乙腈將合并后的上清液定容至25mL，渦旋混勻，用注射器取1mL樣品過0.22μm濾膜得到待測液，待分析；

(2)配制標準品溶液：

分別稱取標準品蘇丹紅I、蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV各10.0mg，用乙腈定容于100mL容量瓶中，得蘇丹紅標準品儲備液，于4℃避光保存三個月；

(3)配制標準品中間液：

分別移取1.00mL蘇丹紅I、II、III、IV標準品儲備液至100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度線，配制濃度為1μg/mL，4℃避光保存；

(4)配制標準品工作液：

將標準品中間液用空白基質溶液配制成濃度分別為200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL標準品工作溶液備用，標準工作溶液現配現用；

(5)將前處理好的樣品用高效液相色譜儀對待測樣品進行定量檢測，得到待測樣品的蘇丹紅殘留量的數值。

2.根據權利要求1所述的檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，其特征在于，步驟(5)具體如下：

A、取10μL待測樣品溶液進樣，用高效液相色譜儀分析檢測，得到待測樣品蘇丹紅I、蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV色譜圖；

B、將配制的不同濃度的標準品工作液溶液，用高效液相色譜儀分析檢測，檢測條件與待測樣品溶液相同，獲得標準品溶液的蘇丹紅I、蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV色譜圖；

C、以待測樣品的蘇丹紅I、蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV和標準品的色譜峰面積制作得到蘇丹紅殘留量的標準曲線；

D、根據待測樣品溶液中蘇丹紅I、蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV色譜峰，結合標準曲線，計算得到待測樣液中蘇丹紅的濃度C，并按以下公式計算得到樣品中蘇丹紅I、蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV的含量X_樣，含量計算公式為：

其中：C_樣-樣品溶液的濃度(μg/mL)；C₀：樣品空白溶液的濃度(μg/mL)；V-定容體積(mL)；m-樣品重量(g)；f-稀釋倍數；C₊-加標的樣品溶液濃度(μg/mL)，C-加標樣品的本底濃度(μg/mL)；計算結果保留兩位有效數字。

3.根據權利要求1所述的檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，，其特征在于，所述用高效液相色譜儀對待測樣品進行檢測的條件為：流動相為乙腈和水，梯度洗脫，洗脫時間25min，流動相流速為：1.000mL/min。

4.根據權利要求3所述的檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，其特征在于，所述乙腈和水的體積比為70∶30。

5.根據權利要求3所述的檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，其特征在于，所述梯度洗脫具體情況見下表：

6.根據權利要求3所述的檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，其特征在于，所述高效液相色譜儀檢測用色譜柱為C₁₈色譜柱，所述色譜柱的尺寸為4.6*150mm*3.5micron；檢測的進樣量為10uL，柱溫：30℃，檢測器為：陣列二極管檢測器。

7.根據權利要求1-6任一項所述的檢測食品中蘇丹紅殘留量的方法，其特征在于，所述食品包括雞蛋、肉類、辣椒制品和油類。