[發明專利]固相萃取和電化學傳感器聯用檢測木犀草素的方法

有效

• 申請號: 202010919092.9
• 申請日: 2020-09-04
• 公開（公告）號: CN112014449B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發明（設計）人: 侯秀丹;楊慶利;吳薇;解萬翠
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 山東三邦知識產權代理事務所(普通合伙) 37308
• 代理人: 肖太升;高洋

1.一種固相萃取和電化學傳感器聯用檢測木犀草素的方法，其特征在于，使用固相萃取柱對待測樣品中的木犀草素進行萃取，收集洗脫液；將ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾的玻碳電極作為電化學傳感器平臺，對洗脫液中木犀草素進行檢測；

所述ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠是向氧化石墨烯、殼聚糖和ZrOCl₂·8H₂O的分散液中添加水合肼后，采用水熱合成法合成，合成產物經冷凍干燥后制得ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠；其具體制備方法如下：

(a)在氧化石墨烯懸浮液中，依次加入殼聚糖和ZrOCl₂·8H₂O，攪拌分散；

(b)在分散后的(a)中加入水合肼，將混合溶液立即轉移到反應釜中，水熱合成反應后，冷卻，離心；

(c)將(b)得到的產物冷凍干燥得到ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠；

所述固相萃取所用的萃取材料為ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾硅膠；所述ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾硅膠是先向氨丙基修飾硅膠與氧化石墨烯分散液中加入N,N-羥基琥珀酰亞胺和1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亞胺攪拌均勻，再加入殼聚糖和ZrOCl₂·8H₂O反應，合成產物經冷凍干燥后制得ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾硅膠；其具體制備方法如下：

①將氨丙基修飾硅膠加入氧化石墨烯懸浮液中，加入N,N-羥基琥珀酰亞胺和1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亞胺，攪拌均勻；

②在①中加入殼聚糖和ZrOCl₂·8H₂O，攪拌反應后，離心；

③將②離心得到的產物進行冷凍干燥，得到ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾的硅膠。

2.根據權利要求1所述固相萃取和電化學傳感器聯用檢測木犀草素的方法，其特征在于，所述ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾的玻碳電極由以下方法制備而成：

(1)裸玻碳電極分別用不同粒徑的氧化鋁粉末打磨至表面呈鏡面，然后分別在硝酸溶液、乙醇和水中超聲處理；

(2)將ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠加入到Nafion溶液中，超聲，分散均勻；

(3)用移液槍吸取(2)中的分散溶液，滴涂到(1)處理干凈的玻碳電極表面，室溫干燥后即得。

3.根據權利要求1所述固相萃取和電化學傳感器聯用檢測木犀草素的方法，其特征在于，所述固相萃取柱為中空柱管，柱管兩端分別設置有上篩板和下篩板，上下篩板之間填充萃取材料。

4.根據權利要求1～3任一項所述固相萃取和電化學傳感器聯用檢測木犀草素的方法，其特征在于，步驟如下：

Ⅰ、將待測樣品溶液通過固相萃取柱，使用洗脫劑進行洗脫，收集洗脫液；

Ⅱ、將步驟Ⅰ得到的洗脫液放入PBS緩沖液中，將ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾的玻碳電極置于含有洗脫液的PBS緩沖溶液中，靜置吸附1-15min；

Ⅲ、將步驟Ⅱ中靜置吸附后的ZrO₂納米顆粒和殼聚糖摻雜石墨烯氣凝膠修飾的玻碳電極作為工作電極與參比電極和對電極置于PBS緩沖液中，連通三電極系統，采用循環伏安法和差分脈沖伏安法進行電化學檢測，掃描速度為25-300mV s^-1。

5.根據權利要求4所述固相萃取和電化學傳感器聯用檢測木犀草素的方法，其特征在于，所述步驟Ⅰ中的條件為：上樣體積30mL，上樣速率1.5mLmin^-1，洗脫劑體積0.5mL，洗脫速率0.5mLmin^-1。