[發明專利]食品中銅鋅-超氧化物歧化酶酶活的檢測方法有效
| 申請號: | 202010918563.4 | 申請日: | 2020-09-04 |
| 公開(公告)號: | CN111979294B | 公開(公告)日: | 2023-09-26 |
| 發明(設計)人: | 黃福偉;黃健翔;唐保國 | 申請(專利權)人: | 上海凈暢檢測科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/26 | 分類號: | C12Q1/26 |
| 代理公司: | 上海遠同律師事務所 31307 | 代理人: | 劉必榕 |
| 地址: | 200438 上海市*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 食品 中銅鋅 超氧化物歧化酶 檢測 方法 | ||
1.一種食品中銅鋅-超氧化物歧化酶酶活的檢測方法,其特征在于,其包括以下步驟:
步驟1、制備待檢測樣品提取液,將該待檢測樣品提取液分為等量的兩份,該兩份分別為第一份樣品提取液和第二份樣品提取液;
步驟2、對第一份樣品提取液以鄰苯三酚自氧化法進行酶活測定,得到第一份樣品提取液的銅鋅-超氧化物歧化酶的酶活為U1;在第二份樣品提取液中加入用于使酶完全失活的酶滅活劑,酶滅活劑為酶抑制劑和氨基酸的混合物,室溫保存2.5小時以上后,用鄰苯三酚自氧化法進行酶活測定,得到第二份樣品提取液的偽酶活為U2;
步驟3、計算待檢測樣品提取液中銅鋅-超氧化物歧化酶的酶活實際值U,U的計算公式為U=U1-U2;
步驟2中,酶抑制劑為十二烷基三甲基氯化銨,氨基酸為組氨酸、色氨酸或苯丙氨酸;
步驟2中,酶抑制劑為十二烷基三甲基氯化銨,氨基酸為色氨酸,酶滅活劑為色氨酸和十二烷基三甲基氯化銨的混合物,在第二份樣品提取液中加入色氨酸和十二烷基三甲基氯化銨的混合物,至色氨酸和十二烷基三甲基氯化銨混合物的濃度大于或者等于10mmol/L;
或者,步驟2中,酶抑制劑為十二烷基三甲基氯化銨,氨基酸為組氨酸,酶滅活劑為組氨酸和十二烷基三甲基氯化銨的混合物,在第二份樣品提取液中加入組氨酸和十二烷基三甲基氯化銨的混合物,至組氨酸和十二烷基三甲基氯化銨混合物的濃度大于或者等于8.0mmol/L;
或者,步驟2中,酶抑制劑為十二烷基三甲基氯化銨,氨基酸為苯丙氨酸,酶滅活劑為十二烷基三甲基氯化銨和苯丙氨酸的混合物,在第二份樣品提取液中加入十二烷基三甲基氯化銨和苯丙氨酸的混合物,至十二烷基三甲基氯化銨和苯丙氨酸混合物的濃度大于或者等于7.5mmol/L。
2.如權利要求1所述的食品中銅鋅-超氧化物歧化酶酶活的檢測方法,其特征在于,步驟2中,加入酶滅活劑后,室溫保存的時間為3小時。
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