[發明專利]兩種中藥配方顆粒的指紋圖譜構建方法和鑒別方法

有效

• 申請號: 202010915647.2
• 申請日: 2020-09-03
• 公開（公告）號: CN112213416B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 洪婉敏;黃瑤;紀玉華;張正;李美洲;陳丹燕;魏梅;孫冬梅;羅文匯;鐘霞;程學仁
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 杜寒宇

本發明涉及兩種中藥配方顆粒的指紋圖譜構建方法和鑒別方法。采用超高效液相色譜法構建了北蒼術配方顆粒指紋圖譜和麩炒北蒼術配方顆粒指紋圖譜。構建的指紋圖譜中色譜峰豐富，能更全面反應北蒼術與麩炒北蒼術中藥配方顆粒的特征，進行更全面的整體的質量評價，所述鑒別方法能明顯找出兩者的差異所在，并解決了原有藥材飲片性狀顯微鑒別點丟失的問題。

技術領域

本發明涉及分析檢測領域，特別是涉及北蒼術配方顆粒指紋圖譜的構建方法、麩炒北蒼術配方顆粒指紋圖譜的構建方法和北蒼術與麩炒北蒼術配方顆粒的鑒別方法。

背景技術

中藥配方顆粒具有沖服、劑量調解方便，規格標準統一，且與相應傳統飲片主治功效一致等特點。北蒼術配方顆粒及麩炒北蒼術配方顆粒分別是以水為溶媒提取北蒼術飲片和麩炒北蒼術飲片，并經濃縮、干燥(噴霧干燥)、制粒成型等生產工藝所制成的。在功效主治上，生品北蒼術溫燥辛烈，具有燥濕、祛風、散寒的功效。可用于治療風濕痹痛，肌膚麻木不仁，腳膝疼痛、風寒感冒等癥。麩炒北蒼術辛味減弱、燥性緩和、氣變芳香，增強了健脾和胃的作用。可用于脾胃不和，痰飲停滯，腕腹痞滿等癥。鑒于北蒼術生品與炮制品功效及應用上的差異，兩者的配方顆粒功效和應用上也有差異。但由于中藥配方顆粒失去了原藥材、飲片所具有的鑒別特征，已無法從藥材原有的形狀、色澤、質地、斷面、氣味等性狀，或油點(“朱砂點”)、白毛狀結晶(“起霜”)這些明顯的顯微的特征進行檢查與鑒別，即，現有的北蒼術及麩炒北蒼術的配方顆粒已失去原有的外觀性狀及顯微上的特征，肉眼上難以對兩者做出鑒別。故建立一種可區分北蒼術及麩炒北蒼術配方顆粒的指紋圖譜，用于對二者進行鑒別顯得至關重要。

2015年版《中國藥典》對北蒼術及麩炒北蒼術飲片的質量控制僅規定了蒼術素這一指標成分。陳祥勝在“蒼術麩炒前后的專屬性HPLC特征指紋圖譜”文中，以蒼術素色譜峰為參照峰，構建了10批蒼術生品和麩炒品的HPLC指紋圖譜的共有模式。發現第47.36min和第46.35min色譜峰的峰面積比值在生品中＞1，但在麩炒品中卻＜1；第51.70min和第49.25min色譜峰的峰面積比值在生品中＜1，但在麩炒品中卻＞1，以此作為生蒼術和麩炒蒼術飲品的定性鑒別特征之一。劉苗苗在“蒼術與麩炒蒼術標準飲片制備技術及其質量評價研究”文中，對北蒼術及其麩炒品飲片進行對比，采用HPLC特征圖譜明確特征性差異，以1號峰(8.80min)與2號峰(11.56min)峰面積比值作為北蒼術和麩炒北蒼術的專屬性質量評價指標。這些報道主要集中在蒼術與麩炒蒼術的飲片質量評價與鑒別上，多是用HPLC(高效液相色譜)進行相關質量研究，對UPLC(超高效液相色譜)指紋圖譜這一塊的研究相對空白，且均集中在藥材飲片上的研究，尚未報道與傳統煎液相似的北蒼術及麩炒北蒼術配方顆粒相關的研究。

而且，目前本領域對中藥配方顆粒的進行質量控制與評價通常采用分析單個或幾個指標成分，亦或是采用薄層鑒別，具有一定的局限性。然而北蒼術及麩炒北蒼術配方顆粒的化學成分均比較相似，鑒別二者存在一定的難度。

發明內容

基于此，本發明提供一種北蒼術配方顆粒和麩炒北蒼術配方顆粒指紋圖譜的構建方法，所構建的指紋圖譜中色譜峰豐富，能更全面反應北蒼術與麩炒北蒼術配方顆粒的特征，進行更全面的整體的質量評價。

本發明所述的北蒼術配方顆粒指紋圖譜的構建方法，包括以下步驟：

以溶劑溶解5-羥甲基糠醛對照品、綠原酸對照品和蒼術素對照品，制備混合對照品溶液；

向溶劑中加入北蒼術配方顆粒，回流后濾過，制備北蒼術配方顆粒供試品溶液；

對所述混合對照品溶液和北蒼術配方顆粒供試品溶液進行超高效液相色譜測定，建立北蒼術配方顆粒指紋圖譜；

所述超高效液相色譜的色譜條件包括：

以乙腈為流動相A，以體積分數為0.08％～0.12％的甲酸水溶液為流動相B，梯度洗脫，所述梯度洗脫包括如下程序：