[發明專利]一種金露梅中提取的α-葡萄糖苷酶抑制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 202010914793.3
• 申請日: 2020-09-03
• 公開（公告）號: CN112159443B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發明（設計）人: 李錦萍;曾陽;左文明;劉力寬;曲宣詔;張俊炎;張瑞峰;薛鶴;劉瑋;李成慧
• 申請（專利權）人: 青海師范大學
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H13/08;C07H1/08;C07C51/42;C07C51/47;C07C65/03;A61K31/192;A61K31/7048;A61K31/7024;A61P3/10
• 代理公司: 廈門智慧呈睿知識產權代理事務所(普通合伙) 35222
• 代理人: 楊唯

1.一種α-葡萄糖苷酶抑制劑的制備方法，其特征在于所述α-葡萄糖苷酶抑制劑包括：槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、沒食子酸和3，4，6-三-O-沒食子酰基-β-D-葡萄糖，且三者的質量比為3:1:3、3:2:2或2:1:2中的一種；所述槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、沒食子酸和3，4，6-三-O-沒食子酰基-β-D-葡萄糖的制備方法包括如下步驟：

(1)提?。悍Q取陰干的金露梅葉500g，過40目篩，1:20g/mL的料液比，用70％乙醇，在80℃下回流提取3次，每次提取2小時，合并提取液，經濃縮得到粗提物0.6L；

(2)分離：將粗提物上大孔吸附樹脂AB-8，依次用10L體積的質量濃度為0、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％的甲醇洗脫，濃縮收集的洗脫液，旋蒸干燥，利用高效液相色譜儀，柱子型號：Welch?Ultimate?MB-C18，柱溫為30℃，流動相：99％超純水，甲醇，檢測條件：5-30％甲醇，60min，檢測波長254nm、280nm和360nm，經大孔吸附樹脂洗脫的洗脫液過0.25μm有機濾膜進行制樣，進樣量為10μL，槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、沒食子酸、3,4,6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖對照品母液進樣量為各5μL，經上述檢測確定其中20％的甲醇洗脫部分為含有目標成分的洗脫液、將含有目標成分的洗脫液在80℃水中濃縮至恒重，即得到含有目標成分的富集物；

(3)制備：將含有目標成分的富集物通過制備液相色譜儀，采用的色譜柱為DAC-HB50，流動相甲醇，柱溫30℃，流動相甲醇A和-2％冰乙酸B，甲醇的質量濃度為45％，等度洗脫，流動相流速為50mL/min，檢測波長為254nm和280nm，進樣量為3mL，采用重復進樣方式，進樣間隔為50min，收集制備液，檢測方法同(2)即得到槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸單體質量為1.6877g、純度為97.6516％；

將收集目標成分的富集物除去槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸的組分，通過快速純化系統，采用制備型色譜柱：江陰漢邦Dubhe?C18，柱溫30℃，流動相為甲醇、1％冰乙酸，20％甲醇等度洗脫，流動相流速為50mL/min，檢測波長為254nm和280nm，進樣量為1.5mL，采用重復進樣方式，進樣間隔為30min，濃縮收集的各峰制備液，利用高效液相色譜儀檢測，柱子型號：Platisil?ODS，C18柱4.6×250mm，5μm，柱溫為30℃，流動相：1％冰乙酸，乙腈，流動相流速為1mL/min，檢測條件為：20-35％乙腈，30min，檢測波長254nm、280nm和360nm，經大孔吸附樹脂洗脫的洗脫液過0.25μm有機濾膜進行制樣，進樣量為10μL，得到沒食子酸質量18.6mg、純度為95.7021％，3,4,6-三-O-沒食子?；?β-D-葡萄糖質量為253.8mg、純度為96.1672％。