[發明專利]一種核酸擴增后處于灰區樣本的確證方法

有效

• 申請號: 202010903774.0
• 申請日: 2020-09-01
• 公開（公告）號: CN112143780B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 吳堅;陳艷菊;伍輝
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/6848
• 分類號: C12Q1/6848;C12M1/34;C12M1/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林超

1.一種核酸擴增后處于灰區樣本的確證方法，其特征在于：在不破壞核酸擴增管的前提下，將含有需要確證的核酸擴增溶液的核酸擴增管和擴增子特異性檢測試劑均預先放入一密閉容器中；然后，在保持密閉容器內部和外部具有隔離的情況下，也即密閉容器內部的生物大分子沒有途徑離開密閉容器進入到周圍環境的情況下，將核酸擴增管打開并和事先已經放入密閉容器中的擴增子特異性檢測試劑混合以進行確證檢測；

所述方法不以疾病診斷為目的；

方法具體為：

首先，在檢測試劑管(6)內加入擴增子特異性檢測試劑，將帶有需要灰區樣本確證的核酸擴增反應液體的核酸擴增反應管放入核酸擴增反應管架中，蓋上密封蓋，卡盒主體和密封蓋形成了密閉空間；

然后，再向下按壓密封蓋，使得密封蓋上的柔性密封材料(13)緊密密封接觸外殼(1)上端口起到預密封的作用；

再繼續向下按壓密封蓋，柔性密封材料(13)壓縮，密封蓋上的凸起(11)壓力經支撐板(7)傳遞到核酸擴增反應管架的彈性材料(8)，使得彈性材料(8)壓縮，整個核酸擴增反應管架下移，刀片(5)與核酸擴增反應管架中的核酸擴增反應管接觸，并割破核酸擴增反應管的底部，核酸擴增反應管內液體流出至檢測試劑管(6)內并然后發生反應；

最后，用所需波長的光源從入射窗(2a)處向外殼(1)內照射，并在觀察窗(2b)觀察結果：若有熒光產生，則為陽性樣本；反之則為陰性樣本，完成灰區樣本的確證檢測；

所述的外殼(1)上設有透氣密封孔(3)，透氣密封孔(3)中嵌有彈性薄膜、濾芯或者硅膠柱。

2.根據權利要求1所述的一種核酸擴增后處于灰區樣本的確證方法，其特征在于：方法采用以下確證裝置，裝置包括卡盒主體、核酸擴增反應管架和密封蓋；

卡盒主體包括外殼(1)、第一刀架(4a)、第二刀架(4b)和刀片(5)，外殼(1)底部內固定放置有檢測試劑管(6)，檢測試劑管(6)上方設有刀片(5)，刀片(5)通過第一刀架(4a)和第二刀架(4b)固定于外殼(1)內；

刀片(5)上方的外殼(1)內裝有核酸擴增反應管架，核酸擴增反應管架包括支撐板(7)、彈性材料(8)、第一通孔(9)和第二通孔(10)，支撐板(7)蓋在彈性材料(8)上面，支撐板(7)和彈性材料(8)的中部開設有第一通孔(9)和第二通孔(10)，第一通孔(9)和第二通孔(10)中裝有核酸擴增反應管(14)；

核酸擴增反應管架上方為外殼(1)上端口，外殼(1)上端口安裝密封蓋，密封蓋包括凸起(11)、蓋板(12)和柔性密封材料(13)；蓋板(12)底面中間固定有凸起(11)，凸起(11)周圍一圈的蓋板(12)底面覆蓋設有柔性密封材料(13)，凸起(11)裝在外殼(1)上端口內，柔性密封材料(13)封蓋在外殼(1)上端口外的端面上。

3.根據權利要求2所述的一種核酸擴增后處于灰區樣本的確證方法，其特征在于：所述的凸起(11)和蓋板(12)采用硬質材料制成；所述的柔性密封材料(13)采用柔性材料制成且厚度使得下壓柔性密封材料(13)能帶動核酸擴增反應管架下移讓核酸擴增反應管被刀片(5)割破。

4.根據權利要求2所述的一種核酸擴增后處于灰區樣本的確證方法，其特征在于：所述的外殼(1)材料由透明材料組成。

5.根據權利要求2所述的一種核酸擴增后處于灰區樣本的確證方法，其特征在于：所述的外殼(1)材料由不透光材料組成，外殼(1)的底部兩側面設有透明封閉的入射窗(2a)和觀察窗(2b)，入射窗(2a)和觀察窗(2b)均正對檢測試劑管(6)，入射窗(2a)外接激發光源，觀察窗(2b)用于觀察檢測試劑管(6)內有無熒光產生。