[發明專利]一種酶標抗體緩沖液、試劑R1和肌酸激酶同工酶測定試劑盒

有效

• 申請號: 202010893094.5
• 申請日: 2020-08-31
• 公開（公告）號: CN112014555B
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發明（設計）人: 劉磊;來祥兵
• 申請（專利權）人: 武漢生之源生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/573;G01N33/58;G01N33/543;G01N33/531
• 代理公司: 北京眾達德權知識產權代理有限公司 11570
• 代理人: 江慧

本發明提供的一種酶標抗體緩沖液、試劑R1和肌酸激酶同工酶測定試劑盒，所述酶標抗體緩沖液的配方為：50mM～150mM緩沖液，5g/L～10g/L電解質，0.1％～1％防腐劑，0.1％～2％表面活性劑，2mM～20mM無機鹽，0.3g/L～1g/L穩定劑，0.1％～3％阻斷劑，0.1％～1％保護劑，pH值為6.4～6.6；其中，所述表面活性劑為Tetronic701、聚氧乙烯油醚中的一種或兩種。所述試劑R1為采用所述的酶標抗體緩沖液稀釋抗CK?MB抗體?堿性磷酸酶標記物獲得的工作液。本發明在2～8℃下能穩定12個月且生物活性良好；對非特異性吸附有著較好的抵抗效果。

技術領域

本發明屬于免疫檢測技術領域，涉及一種酶標抗體緩沖液、試劑R1和肌酸激酶同工酶測定試劑盒。

背景技術

急性心肌梗死(acute?myocardial?infarction，AMI)是冠狀動脈急性、持續性缺血缺氧所引起的心肌壞死，可并發心律失常、休克或心力衰竭，常危及生命。本病在歐美最常見，美國每年約有150萬人發生心肌梗死。中國近年來呈明顯上升趨勢，每年新發至少50萬，現患至少200萬。

肌酸激酶(Creatine?Kinase，CK)，也稱為肌酸磷酸激酶。CK是由M和B兩個亞基組成的二聚體，有三種同工酶即CKMM、CKMB、CKBB，不同肌肉內同工酶的比例不同。CK-MB主要分布于心肌細胞中，在心肌損傷后3～4小時上升，24小時達到最高點，3天內可恢復正常。CK-MB是當今最廣泛的心肌損傷標志物之一，CK-MB對判斷心肌壞死也有較高的特異性，由于檢測窗口期相對較短，CK-MB測定也適于診斷再發心肌梗死，如檢測到CK-MB升高則預示著心肌壞死，是ACS患者評估中的重要預后指標，尤其是NSTE-ACS患者，入院后CK-MB濃度與30天病死率呈正相關性，CK-MB濃度低于參考范圍上限者30天病死率為1.8％，濃度為參考范圍上限1～2倍者為3.3％，而濃度大于參考范圍上限10倍者為8.3％，CK-MB在心肌疾病中，尤其是心肌梗死的診斷、治療過程中有著舉足輕重，甚至不可替代的作用。

在體外診斷試劑中，試劑的穩定性與抗干擾能力都是必不可少的，如在CN103278623A提到，試劑可在37℃條件下放置7天仍保持活性不變，并且其對于CK-MM與CK-BB的特異性交叉反應有較好的抗干擾能力，試劑性能優越。但當前的臨床背景下，試劑盒所需抗干擾能力應該更強，如患者體內存在的類風濕因子(RF)和人抗鼠抗體(HAMAs)均會對檢測結果產生影響，而且單一的37℃條件穩定性并不能適用于日常臨床診斷。

由此可見，目前試劑盒需要更高特異性，并在有臨床分析價值的試劑儲存條件下具備長期的有效活性。

因此，如何制備一種穩定性好、能抗非特異性吸附的酶標抗體緩沖液、試劑R1和肌酸激酶同工酶測定試劑盒，成為亟待解決的技術問題。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種酶標抗體緩沖液、試劑R1和肌酸激酶同工酶測定試劑盒，穩定性好：在2～8℃下能穩定12個月且生物活性良好；在抗干擾方面，非離子表面活性劑對于非特異性吸附有著較好的抵抗效果。

本發明通過以下技術方案實現：

本發明的目的之一在于提供一種酶標抗體緩沖液，所述酶標抗體緩沖液的配方為：

50mM～150mM緩沖液，5g/L～10g/L電解質，0.1％～1％防腐劑，0.1％～2％表面活性劑，2mM～20mM無機鹽，0.3g/L～1g/L穩定劑，0.1％～3％阻斷劑，0.1％～1％保護劑，pH值為6.4～6.6；

其中，所述表面活性劑為Tetronic701、聚氧乙烯油醚中的一種或兩種。

進一步地，所述Tetronic701和聚氧乙烯油醚的質量比為(0.8～1.2)：(0.8～1.2)。